【摘 要】
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目的探讨人牙骨移植材料对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响,深入了解人牙骨移植材料生物相容性及诱导成骨的能力和机制。方法收集制备人牙骨移植材料,与临床常用的骨移植材料OSTEONⅡ作对比,分别与小鼠前成骨细胞MC3T3-E1直接接触共培养,实验分为4组,A组为空白对照组、B组为未处理人牙骨材料组、C组为OSTEONⅡ组、D组为复合酸处理的人牙骨移植材料组。分别在倒置显微镜下观察共同
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目的探讨人牙骨移植材料对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响,深入了解人牙骨移植材料生物相容性及诱导成骨的能力和机制。方法收集制备人牙骨移植材料,与临床常用的骨移植材料OSTEONⅡ作对比,分别与小鼠前成骨细胞MC3T3-E1直接接触共培养,实验分为4组,A组为空白对照组、B组为未处理人牙骨材料组、C组为OSTEONⅡ组、D组为复合酸处理的人牙骨移植材料组。分别在倒置显微镜下观察共同培养7d后观察细胞形态;免疫荧光显微镜下了解细胞在材料上的粘附情况;应用MTT检测法共培养1d、3d、5d和7d后判断细胞增殖情况;7d后分别检测碱性磷酸酶ALP活性;茜素红实验观察矿化结节并进行矿化率分析;western blot检测BMP2、BMP7、I型胶原蛋白(COL-I)的表达,通过real time PCR检测BMP2、BMP7、COLI和碱性磷酸酶ALP基因的m RNA水平表达。结果共培养7d后各组细胞形态良好,D组细胞出现有明显的梭形分化状态。免疫荧光显微镜下可见前成骨细胞MC3T3-E1在C、D两组材料上均有大量粘附,有分化形态出现,D组可见明显分化。MTT结果显示在共培养1d和3d,4组细胞OD值无明显差别,5d在细胞增殖的前提之下C组OD值最高,在7d时C组和D组OD值有一致的趋势产生,且均高于A组和B组。人牙骨移植材料ALP活性、茜素红染色矿化结节及矿化率的分析、COL-I、BMP7、BMP2蛋白表达及m RNA表达结果均显示最高水平表达。结论人牙骨移植材料可促进前成骨细胞MC3T3-E1的增殖和成骨分化,提高前成骨细胞MC3T3-E1的ALP活性、矿化结节形成、COL-I、BMP7、BMP2等蛋白和基因的表达,人牙骨移植材料具有骨移植替代材料的潜在优势,可以作为骨移植材料在临床促进骨缺损的修复与重建。
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