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Barrett食管(Barrett’s esophagus，BE)是指发生在食管下段的柱状上皮化生取代原有的复层鳞状上皮的一种病理现象，可伴有或不伴有肠上皮化生，被认为是食管腺癌（esophagus adenocacinoma，EAC）的癌前病变，与EAC的发生有着密切的关系。上世纪90年代初就有国外文献报道BE癌变的风险是非BE患者的30—125倍。BE发展为EAC的顺序通常为化生-异型增生-腺癌。表观遗传学是肿瘤形成的机制之一，DNA甲基化或超甲基化是表观遗传学中重要的修饰手段。miRNAs是一种以21～25个核苷酸(nucleotide，nt)序列为长度的内源性的非编码RNA，可以降解靶基因mRNA或抑制其翻译，其起作用的方式主要是与靶基因mRNA3’-UTR完全或不完全匹配。MiR205是miRNA家族中的成员之一，在多种肿瘤发生发展和转移过程中发挥了重要作用。研究发现，miR205在食管癌中的表达要明显低于正常食管组织。然而，miR205在EAC中表达下降的机制和在BE中的表达情况及其机制，国内尚未见报道。目的：以表观遗传学为依据，检测miR205在不同细胞系中的表达情况和其启动子甲基化状态，探讨BE癌变与miR205启动子甲基化之间的关系。方法：1、培养正常食管、BE和食管癌细胞株；2、运用荧光定量PCR（real time PCR)检测各细胞株中miR205表达水平，采用甲基化特异性聚合酶链式反应（Methylation-Specific PCR,MSP）检测各个样本中的miR205启动子甲基化水平；3、采用去甲基化药物处理miR205表达缺失或下降的细胞株；4、采用荧光定量PCR检测经处理后各细胞株中miR205表达水平，MSP检测去甲基化处理后样本中miR205启动子甲基化水平；5、分析数据，评估miR205启动子甲基化水平与其在细胞系中表达水平的相关性。结果：1、细胞生长增殖情况BE和食管癌细胞经去甲基化处理前约72小时生长增殖可铺满25ml培养瓶瓶底，计数约5*106，经处理后细胞生长增殖受抑制，120小时后生长范围占瓶底约70%~80%，计数约3-4*106。2、miR205在样本中的表达情况通过荧光定量PCR方法对所有样本miR205表达量进行检测，结果显示所有BE及食管癌细胞样本miR205表达量均低于正常食管粘膜细胞，其差异具有统计学意义(F=6.308，P=0.002）。3、给予去甲基化药物处理后样本miR205的表达情况给予去甲基化药物处理后，BE细胞株B-T、B-T10及食管癌细胞株EC109、TE-10、SEG-1的miR205表达量较之前明显升高，处理前后其miR205表达水平差异具有统计学意义（P=0.000）。经去甲基化处理后，食管癌细胞系中miR205表达水平较BE细胞系升高幅度更大，但其差异并不具有统计学意义（P=0.176）。4、MSP检测去甲基化处理前后启动子甲基化情况去甲基化处理前，正常食管粘膜细胞株（NES）启动子呈非甲基化，BE和食管癌细胞株启动子呈甲基化或高甲基化，使用去甲基化药物处理miR205表达降低或缺失的细胞后，MSP检测到相应的启动子呈低甲基化或非甲基化。结论：1、在BE和食管癌细胞系中，miR205表达较正常食管粘膜细胞降低。2、miR205表达减少与其启动子区甲基化状态有关，去甲基化处理可抑制BE和食管癌细胞的增殖。3、miR205启动子甲基化贯穿了BE的癌变过程，是BE癌变过程中的重要分子生物学标志，并可能成为预防和治疗BE癌变的靶点。