microRNA-451a/YWHAZ调控肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究

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目的:探讨microRNA-451a/YWHAZ对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响。方法:(1)过表达microRNA-451a的慢病毒及其阴性对照感染A549细胞,稳定传代后用嘌呤霉素进行药筛以获取慢病毒感染后的稳定细胞株;qRT-PCR检测慢病毒感染率;随后两组细胞进行CCK8实验、细胞集落形成实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞生物学行为的变化。(2)使用生物信息学方法,即Targetscan和miRDB预测microRNA-451a的潜在靶点YWHAZ。(3)沉默YWHAZ的慢病毒及其阴性对照组感染A549细胞,筛选稳转细胞株进行CCK8实验、集落形成实验、细胞划痕实验、Transwell实验,以检测两组细胞生物学行为的变化。结果:(1)过表达microRNA-451a后,CCK8检测A549细胞的增殖能力被抑制,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆形成实验结果显示,过表达microRNA-451a组的克隆形成数(100.30±10.03个/平皿)较oe-NC组(174.21±10.30个/平皿)细胞增殖数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕修复实验结果显示,microRNA-451a组(34.19±2.13%)比oe-NC组(50.06±4.23%)迁移率降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验结果显示,过表达microRNA-451a组(20.70±1.59个/视野)较oe-NC组(79.45±6.09个/视野)细胞迁移数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05),而过表达microRNA-451a组(50.47±3.90个/视野)较oe-NC组(98.50±7.31个/视野)细胞侵袭数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Targetscan和miRDB预测microRNA-451a和YWHAZ存在结合位点,并在microRNA-451a过表达的A549细胞株中,YWHAZ mRNA表达水平明显下降。(3)沉默YWHAZ后,CCK8检测A549细胞的增殖能力被抑制,差异具有统计学意义(P<0.05);克隆形成实验结果显示,si-YWHAZ组的克隆形成数(35.11±2.35个/平皿)si-NC组(56.67±4.75个/平皿)细胞增殖数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕修复实验结果显示,si-YWHAZ组(20.43±1.28%)比si-NC组(30.08±2.26%)迁移率降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验结果显示,si-YWHAZ组(48.33±3.60个/视野)较si-NC组(77.70±5.23个/视野)细胞迁移数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05),而siYWHAZ组(50.20±3.52个/视野)较si-NC组(110.00±9.81个/视野)细胞侵袭数目明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:microRNA-451a可能靶向YWHAZ抑制肺腺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭。
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