论文部分内容阅读
研究目的: 1.通过老年胆管结石患者围手术期感染及免疫功能状态的对比研究,阐明老年胆管结石患者术后感染并发症发生的可能免疫学机制。 2.研究老年胆管结石患者效应T细胞免疫功能变化与围手术期感染发生之间的关系。 3.研究老年胆管结石患者调节性T细胞免疫功能的变化与围手术期感染发生之间的关系。 研究方法: 将2011年6月至2014年12月在解放军第309医院肝胆外科胆管结石患者共190人纳入研究对象,其中小于60岁中青年组123例、大于及等于60岁老年组67例,术前均排除肺部、腹腔、胆道、全身感染。术后按2001版《医院感染诊断标准(试行)》再将中青组及老年组分别分成术后感染组及术后无感染组。根据胆管结石为原发性或继发性分别行胆囊切除、胆管空肠吻合术或肝部分切除、胆囊切除、胆总管探查、T管引流术或胆囊切除、胆总管切开取石、T管引流术。于术前1d、术后第1d、第3d、第7d分别抽取患者外周静脉血8 ml用于指标检测。 第一部分:胆管结石患者效应T细胞免疫功能变化与患者术后感染的关系 1.外周血单个核细胞(PBMC)增殖活性检测:检测中青年组、老年组胆管结石患者围手术期各个阶段PBMC增殖活性水平,探讨免疫细胞活性变化与围手术期感染发生的关系。 2.患者外周血IL-2、IFN-γ和IL-4水平的检测:通过ELISA试剂盒,检测IL-2、IFN-γ和IL-4水平的变化,揭示胆管结石各组患者围手术期效应T细胞功能变化与感染发生之间的关系。 第二部分:胆管结石患者调节性T细胞免疫功能变化与患者术后感染的关系 1.流式细胞术检测人外周血中Treg细胞数量及其转录因子Foxp3、表面分子CTLA-4表达水平,探索老年胆管结石患者Treg细胞数量和功能表型变化与术后感染的相关性。 2.患者外周血IL-10、TGF-β水平的检测:通过ELISA试剂盒,检测IL-10、TGF-β水平变化规律,揭示老年患者围手术期调节T细胞功能的变化与感染发生之间的关系。 实验结果: 1.老年胆管结石患者与中青年胆管结石患者相比,感染发生率明显增多,具有统计学差异。 2.当机体接受手术应激后效应T淋巴细胞在增殖活性、功能极化、分泌等功能方面发生显著改变,并且其改变在不同年龄组差异显著,在有无感染组亦表现不同,具体表现为:中青年组效应T淋巴细胞增殖活性、IL-2分泌水平在术后第一天下降,之后逐渐恢复至术前水平;术后早期有向Th2细胞漂移迹象,但随后即恢复,以有无感染分组比较后发现,感染组较无感染组上述变化趋势更加明显(P<0.05);老年组效应T淋巴细胞在增殖活性、IL-2分泌和Th2细胞漂移方面早期无明显变化但随着时间推移逐步降低且持续时间长,老年感染组较无感染组上述变化程度更加明显。 3.当机体接受手术应激打击后调节性T淋巴细胞在数量、表型及分泌功能等功能方面亦发生显著改变,并且其改变在不同年龄组差异显著,在有无感染组亦表现不同,主要表现为:中青年组调节性T淋巴细胞数量、功能表型(Foxp3、CD152表达)、分泌活性(IL-10、TGF-β分泌)在术后第一天明显升高,之后逐渐恢复至术前水平,以有无感染分组比较后发现,感染组较无感染组上述变化趋势更加明显(P<0.05);老年组调节性T淋巴细胞数量,功能表型(Foxp3,CD152表达),分泌活性(IL-10,TGF-β分泌)方面早期无明显变化但随着时间推移逐步升高且持续时间长,老年感染组较无感染组上述变化程度更加明显。 结论: 1.胆管结石患者在接受手术应激以后机体T淋巴细胞(效应T淋巴细胞和调节性T细胞)发生显著改变,且与胆管结石患者术后感染并发症发生关系密切; 2.胆管结石的老年患者与中青年患者相比其术后感染并发症发生率高,通过比较其免疫学指标发现,老年患者存在基础免疫功能下降,且在接受手术应激以后免疫细胞反应迟缓、持续等特点,这与其术后抗感染能力减弱有关; 3.动态监测患者T淋巴细胞免疫反应能力有助于及时了解患者免疫状态,并为评估患者感染发生可能性提供新策略。