荷叶离褶伞子实体化学成分与生物活性研究

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荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes)是一种十分珍贵的野生食药兼用菌。本实验通过回流提取法、硅胶柱色谱等方法对荷叶离褶伞的化学成分进行分离纯化;通过比色法、滤纸片扩散法和MTT法对荷叶离褶伞子实体的抗氧化活性、抑菌作用和抗人体卵巢癌能力进行研究。1.对荷叶离褶伞的子实体进行分离、纯化得到6个单体化合物,通过核磁共振、质谱、H1-NMR、C13-NMR和HMBC等方法进行结构鉴定,分别鉴定为胆甾烯酮类化合物(化合物1)、麦角甾醇、正辛烷、赛勒维甾醇、己六醇和葡萄糖,提取得到的6种单体化合物均为首次从荷叶离褶伞中分离得到。利用石油醚萃取方法提取荷叶离褶伞子实体挥发性成分,通过气-质联用仪对挥发性成分进行分析,分离鉴定16种化学成分中有10个酯,3个脂肪酸,1个酰胺、1个烷烃类,另外还有1个聚合物。2.利用比色法对荷叶离褶伞子实体石油醚萃取物(SYM)、乙酸乙酯萃取物(YSYZ)、正丁醇萃取物(ZDC)和多糖的总还原力、DPPH自由基清除力、超氧阴离子O2-自由基清除力进行了测定,并与维生素C进行了比较,结果是:DPPH自由基清除力顺序:Vc>(YSYZ)>(ZDC)>(SYM)>多糖;超氧阴离子自由基清能力顺序: Vc>(SYM)>多糖>(YSYZ)>(ZDC);总还原力能力顺序为:Vc>(ZDC)>其他成分,而(SYM)、多糖和(YSYZ)的清除能力比较相近。(YSYZ)的DPPH自由基清除力最强,(ZDC)的总还原力最强。(SYM)的超氧阴离子自由基清除能力最强。3.利用滤纸片扩散法对荷叶离褶伞子实体(SYM)、(YSYZ)、(ZDC)和多糖的抑菌能力进行了测定,供试菌株为:鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、绿脓假单胞菌(Pesudomonas pyocyaneum)、克氏库克菌(Micrococcus kristinae)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。(SYM)对于鼠伤寒沙门氏菌抑菌率为25.0%-55.0%、(YSYZ)抑菌率为7.7%-23.1%、(ZDC)抑菌率为7.7%-38.5%、多糖抑菌率为10.4%-45.9%;各个供试样品对绿脓假单胞菌均没有抑菌作用;(SYM)对于金黄色葡萄球菌的抑菌率为25.0%-55.0%、(YSYZ)抑菌率为11.5%-30.8%、(ZDC)和多糖对金黄色葡萄球菌没有抑菌作用;(SYM)对于克氏库克菌的抑菌率为17.5%-25.0%、多糖的抑菌率为16.3%-40.7%、(YSYZ)和(ZDC)对克氏库克菌没有抑菌作用。4.利用MTT法分别对荷叶离褶伞子实体多糖、(SYM)、(YSYZ)、(ZDC)、胆甾烯酮类化合物、麦角甾醇、塞勒维甾醇和己六醇的抗人体卵巢癌作用进行了研究。结果表明:(SYM)对体外抗人体卵巢癌的抑制率为20.3%-47%;(YSYZ)抑制率为19.4%-45.7%;(ZDC)抑制率为10.4%-43.0%;荷叶离褶伞子实体多糖抑制率为9.1%-43.6%;胆甾烯酮类化合物抑制率为14.3%-21.6%;麦角甾醇抑制率为13.2%-26.1%;赛勒维甾醇抑制率为11.3%-22.3%;己六醇抑制率为3.2%-11.1%。
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