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目的:探讨mi R-320对人结肠癌细胞生物学行为、5-FU和奥沙利铂化疗耐药及放射线抵抗的影响,并初步阐明mi R-320逆转人结肠癌细胞耐药及放疗抵抗的机制。方法:1.选择mi R-320相对低表达的HCT116结肠癌细胞及mi R-320相对高表达的HT-29细胞,分别转染mi R-320 mimics及mi R-320 inhibitor,并各自转染无义序列NC为对照组。采用实时定量PCR方法检测结肠癌细胞mi R-320表达变化。2.采用MTT法、克隆形成试验检测转染后四组结肠癌细胞(HCT116-mimics、HCT116-NC、HT-29-inhibitor、HT-29-NC)的增殖能力;采用流式细胞术检测四组结肠癌细胞凋亡和细胞周期;采用Transwell实验检测四组结肠癌细胞迁移及侵袭能力。MTT法检测5-FU和奥沙利铂对四组细胞的抑制率并计算IC50值。MTT法检测经放射线处理后的细胞活性。3.采用双荧光素酶报告基因试验验证mi R-320是否可与FOXM1 3’UTR靶向结合。RT-PCR技术检测mi R-320对FOXM1 m RNA表达水平的影响。Western blot技术检测mi R-320对FOXM1、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白表达水平的影响。结果:1.RT-PCR结果显示,转染后mi R-320表达水平在HCT116-mimics组细胞较HCT116-NC组细胞明显升高;HT-29-inhibitor组则较HT-29-NC组明显下降。2.上调mi R-320明显抑制HCT116结肠癌细胞增殖及克隆形成能力,抑制细胞周期进展,抑制细胞迁移及侵袭,并增强细胞对5-FU、奥沙利铂及放射线的敏感性,但不影响细胞凋亡率;下调mi R-320则增强HT-29结肠癌细胞增殖及克隆形成能力,促进细胞周期进展,增强细胞迁移及侵袭能力,并降低细胞对5-FU、奥沙利铂及放射线的敏感性,但不影响细胞凋亡率。3.双荧光素酶报告基因试验中,共转染mi R-320 mimics后荧光素酶活性明显降低,而FOXM1 3’UTR突变组中荧光素酶活性则无明显变化,表明mi R-320可靶向结合于FOXM1 3’UTR区。RT-PCR结果显示,转染后FOXM1 m RNA水平的改变无统计学意义。Western blot结果显示,上调mi R-320后,FOXM1、β-catenin、Cyclin D1、c-myc蛋白水平明显下降;相反,下调mi R-320后,上述蛋白表达量均明显升高。结论:1.mi R-320可抑制结肠癌细胞增殖、细胞周期进展、细胞迁移及侵袭能力,并增强结肠癌细胞对5-FU、奥沙利铂及放射线的敏感性。2.结肠癌细胞中mi R-320可靶向抑制FOXM1表达,这在mi R-320对5-FU、奥沙利铂及放射线敏感性的调控中可能具有重要作用。