【摘 要】
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本实验将白花柽柳(Tamarix albiflonum)质膜水通道蛋白基因TaAQP,分别正向和反向插入到植物表达载体pBI121中,经对表达载体pBI121的测序表明所得序列与目的基因序列一致,可用
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本实验将白花柽柳(Tamarix albiflonum)质膜水通道蛋白基因TaAQP,分别正向和反向插入到植物表达载体pBI121中,经对表达载体pBI121的测序表明所得序列与目的基因序列一致,可用于对烟草的转化。利用农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将TaAQP基因导入异源植物烟草,对已获得的转TaAQP基因烟草的再生植株进行PCR检测和PCR-Southern检测,结果表明成功获得转正向和反向TaAQP基因的烟草。通过Northern检测,得知该基因得以表达,但不同株系的外源基因表达水平不尽相同。4个正向转基因烟草植株中,外源基因均有所表达,其中T1号表达量较少,T2、T5、T6表达量较多;在选取的4个反向转基因烟草植株中,T1、T3、T5、T8号植株中外源基因均有所表达,其中T3、T8号中的表达量较少,T1、T5号中表达量较多。通过观察低渗溶液对原生质体的处理,发现转正向TaAQP基因的烟草叶肉原生质体吸水速度明显快于对照组和转反向基因的烟草,转正向基因的烟草原生质体在5分钟内有大量破裂,转反向TaAQP基因的烟草在经过低渗溶液处理30分钟后,仍有一定数量的原生质体完好,从而验证了TaAQP基因的功能。
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