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海洋微藻因其特殊的生长环境而使细胞在生长过程中能合成功能独特的多糖等多种生物活性物质,随着多糖的生物活性越来越多的被发现,对微藻多糖的研究成为热点。海洋微藻Sarcinochrysis marina Geitler.(S.Marina)和绿色巴夫藻Pavlova viridis(P.viridis)均属金藻门,在其生长至稳定期能大量合成多糖。本文从S.Marina和P.viridis多糖的提取工艺研究入手,经分离纯化分别得到多糖SMP-0和PPS-0,并利用超声辅助H2O2-Vc体系诱导产生的自由基降解、分级多糖,获得相对均一的低分子量多糖,其后对这几个组分的多糖样品分别进行了理化性质检测和化学结构的初步分析,同时考察了不同分子量多糖的免疫调节活性、体内抗肿瘤、抗氧化及吸湿、保湿活性,结果如下: (1)过氧化氢辅助抗坏血酸可以均匀的降解多糖SMP-0和PPS-0,经Sepherose6B纯化后,获得五个组份均一的多糖SMP-1、SMP-2、SMP-3和PPS-1、PPS-2,其分子量分别为452.79、168.66、8.69和386.96、54.99kDa。 (2)多糖理化性质测定结果表明,SMP和PPS均为杂多糖,硫酸基含量在13％至25%之间;糖醛酸含量受降解影响较大,降解条件越剧烈其含量越低;SMP由阿拉伯糖、D-果糖和葡萄糖组成,PPS是由鼠李糖、D-果糖、葡萄糖和甘露糖组成,降解后的多糖样品与未降解的多糖单糖组成的摩尔比有显著差异;红外光谱分析结果显示,几个组分多糖样品均出现硫酸基特征吸收峰,表明两种微藻多糖均为硫酸酯多糖,且SMP-0及其降解产品的糖苷键构型为α-吡喃构型,而PPS-0及其降解产品为β-吡喃构型。 (3)多糖体外免疫活性测定结果表明:S.Marina和P.viridis多糖及其降解产品在实验浓度范围内均能促进小鼠巨噬细胞和淋巴细胞的增殖,增强诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生NO和吞噬中性红的能力,从而证明了S.Marina和P.viridis多糖及其降解产品有免疫激活作用,且低分子量多糖样品的免疫促进效果好于高分子量多糖。 (4)体内抗肿瘤实验结果显示S.Marina和P.viridis多糖及其降解产品均可抑制小鼠移植性S180实体瘤的生长,其中在高剂量组(200mg/kg/d),SMP-2和PPS-1的抑瘤率分别达到58.51%和57.21%;多糖组小鼠的脾指数和胸腺指数较模型对照组和阳性对照组均有显著提高;体外培养脾淋巴细胞实验结果表明,各多糖样品均能促进荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖。 (5)S.Marina和Pavlova Viridis多糖及降解产品抗氧化能力显著,能够清除羟自由基和有机自由基DPPH,抑制卵磷脂体系中脂质过氧化的发生,并能抑制H2O2诱导的小鼠红细胞溶血。不同分子量的多糖抗氧化能力均呈现量效关系,且与其分子量大小呈负相关,与硫酸基及糖醛酸含量呈正相关。 (6)保湿实验结果显示S.Marina和Pavlova Viridis多糖及降解产品具有良好的吸湿性和保湿性,与分子量大小呈正相关。其中大分子量的SMP-0和PPS-0吸湿率分别为49.18%和47.8%,略小于甘油的吸湿率;保湿活性分别比甘油高47.21%和40.61%。