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海洋是一种独特复杂的生态系统,蕴含着丰富的生物资源。海洋极端和特殊的生存环境,使海洋微生物演化形成了较为特殊的代谢机制和途径,其产生的胞外多糖在结构和活性功能上新颖多样。本文以4种不同海洋生境来源的微生物发酵液为研究对象,从中分离纯化胞外多糖,并对其进行理化性质分析,结构解析及体外抗氧化活性测定。研究结果如下：1.从黄河三角洲表面盐层泥土耐盐真菌Cladosporium cladosporioides OUCMDZ-2713的发酵液中分离胞外多糖,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析及Sephacryl S-100凝胶渗透柱层析对多糖进行进一步分离纯化,得到多糖组分Ms4-1。高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和PMP柱前衍生高效液相色谱(HPLC)分析表明,Ms4-1的分子量为19.8 kDa,单糖组成为Man、GlcN、 GlcUA、GalNAc、Glc和Gal,其摩尔比为0.4：0.4：1.0：1.5：2.0：0.2。通过部分酸水解、甲基化分析、核磁共振波谱(1D,2D NMR)和质谱(ESI-MS, ESI-CID-MS/MS)分析表明,Ms4-1主链主要由→3)-β-D-G1cpUA(1→、→4)-β-D-GlcpUA(1→和→3)-α-D-GalpNAc(1→组成的五糖核心结构和Glc长链组成,由Glc组成的长链连接于五糖核心结构中→3)-β-D-GlcpUA(1→的C-3上,Glc长链由→4)-α-D-Glcp(1→组成。体外抗氧化活性测定表明,Ms4-1清除DPPH自由基,超氧阴离子自由基和羟自由基活性的能力高,EC50值分别为1.06 mg/mL、0.21mg/mL和0.58 mg/mL。这是首次从耐盐真菌Cladosporium cladosporioides中获得结构新颖且具有强抗氧化活性的杂多糖,为“海洋糖库”提供了新颖特征的海洋胞外多糖。2.从广西涠洲岛红树林根泥真菌Aspergillus versicolor PJX-9的发酵液中分离胞外多糖,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析及Sephacyl S-100凝胶渗透柱层析对多糖进行进一步分离纯化,得到两个多糖组分Pwl-1和Ps1-1。HPGPC分析表明,Pwl-1和Ps1-1的分子量分别为12.3 kDa和13.6 kDa; HPLC分析表明,Pwl-1和Psl-1单糖组成相似,主要由Man组成,还有少量的Glc和Gal,摩尔比分别为9.3：1.3：1.0和6.4：1.1：2.1。甲基化分析表明,Pwl-1主要含有(1→2)-Manp,还有少最(1→6)-Manp.(1→6)-Glcp.(1→2,6)-Manp及未端Manp和Galf。体外抗氧化活性测定表明,Pw1-1清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的EC50分别为3.39 mg/mL、1.50 mg/mL和1.72 mg/mL。3.从山东东营黄河三角洲自然保护区香蒲共生真菌A-154的发酵液中分离胞外多糖,通过Q Sepharose Fast Flow阴离了交换柱层析及Sephacyl S-100凝胶渗透柱层析纯化得到两个多糖组分Awl-1和Asl-1。HPGPC分析表明,Awl-1和Asl-1分子量分别为11.7 kDa和6.6 kDa: HPLC分析表明,Awl-1含有Man和Gal,其摩尔比为14.1：1.0。甲基化分析表明Awl-1主要含有Manp(1→、 (1→6)-Manp和(1→2,3)-Manp,还有少量Galf(1→及(1→2)-Manp.体外抗氧化活性测定表明,Awl-1具有较强的清除自由基能力,对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除EC50值分别为3.0 mg/mL、1.21 mg/mL和1.50mg/mL。4.从南海文昌霞场红树林共附生真菌A spergillus sp.FJ-6的发酵液中分离胞外多糖,通过Q Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析及Sephacyl S-100凝胶渗透柱层析纯化得到四个多糖组分Fwl-1、Fs1-1、Fs2-1和Fs3-1,分子量分别为11.9 kDa、17.2 kDa、16.4 kDa和18.2 kDa。Fw1-1的单糖组成为Man、Glc和Gal,摩尔比为5.2：1.4：1.0。甲基化分析表明,Fwl-1含有大量(1→2)-Manp、(1→4)-Glcp和(1→2,3)-Manp,少量(1→6)-Manp、Manp(1→、Galf(1→和微量Glcp(1→。大量(1→2,3)-Manp的存在表明Fwl-1是高分支结构,分支点位于(1→2)-Manp的C-3位,Fwl-1结构新颖,在海洋真菌中少见。体外抗氧化活性测定表明,Fwl-1具有较强的清除自由基能力,对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除EC50值分别为3.60 mg/mL、1.21 mg/mL和1.64 mg/mL。本论文的研究成果为我国“海洋糖库”提供了结构新颖和抗氧化活性的海洋微生物胞外多糖,为发掘新颖的海洋微生物胞外多糖资源提供了理论依据。