柑橘大实蝇[Bactrocera(Tetradacus)minax(Enderlein)]是仅危害芸香科柑橘属(Citrus L.)果实的国内外重要检疫性害虫,在中国广泛分布于贵州、湖北、湖南、四川和重庆等地,在国外的分布区域包括不丹、日本、印度和越南等国家。植物挥发物和昆虫信息素对调控昆虫行为和化学交流具有重要作用,且它们具有高效无污染的防治优点。柑橘果实挥发物在不同的柑橘品种间存在差异性,且柑橘果实挥发物和柑橘大实蝇信息素成分目前尚不清楚。本研究采用顶空固相微萃取方法结合气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS),对不同品种的柑橘青果挥发物和柑橘大实蝇信息素成分进行了收集鉴定,随后采用气相色谱-触角电位联用技术(GC-EAD)筛选出对柑橘大实蝇触角具有活性的挥发物成分,结合触角电位技术(EAG)分别测定不同日龄和性别的柑橘大实蝇对不同剂量活性挥发物和信息素成分的触角电位反应。本研究取得的主要研究结果如下:1.不同品种的柑橘青果挥发物分析本研究对柑橘大实蝇喜好性较强的柑橘品种红江橙、脐橙、温州蜜柑以及喜好性较弱的柑橘品种尤里克柠檬和香水柠檬分别进行了挥发物成分的鉴定分析。结果共鉴定出72种挥发物,包括32种碳氢化合物、19种醇、4种醛、11种酮、4种酯和2种醚,各挥发物物质在上述五个柑橘品种中的分布和含量具有差异性和相关性,其中挥发物成分主要以烃类为主。对上述挥发物成分决定的因子载荷图进一步进行主成分分析(PCA),结果表明上述五个柑橘品种具有明显的区分与联系。2.红江橙青果挥发物中活性物质的反应研究红江橙青果挥发物中的柠檬烯、4-萜烯醇和柠檬醛活性成分能引起柑橘大实蝇雄虫的触角电位反应,而柑橘大实蝇雌虫仅对柠檬烯和壬醛有触角电位反应。进一步采用EAG技术分析不同性别和日龄的柑橘大实蝇对不同剂量的挥发物活性成分的触角电位反应,发现柑橘大实蝇的EAG反应明显受除单变量日龄以及多变量日龄×剂量相互作用的影响,且在100μg和1,000μg剂量下的挥发物活性成分能引起柑橘大实蝇产生最大的触角电位反应。3.柑橘大实蝇信息素成分鉴定与触角电位反应研究本研究采用HS-SPME-GC-MS鉴定技术,研究结果表明15日龄性成熟但未交配的柑橘大实蝇雄虫和雌虫在不同的时间段均可以释放一种成分为N-(3-甲基丁基)乙酰胺的挥发物,其可能为柑橘大实蝇信息素。进一步利用触角电位技术测定了3日龄和15日龄柑橘大实蝇成虫对1μg、10μg、100μg和1,000μg四种不同剂量的N-(3-甲基丁基)乙酰胺的触角电位反应,结果发现柑橘大实蝇成虫对N-(3-甲基丁基)乙酰胺均产生明显的触角电位反应,且最适含量范围为100μg到1,000μg,其中单变量剂量以及多变量剂量和性别的相互作用会对柑橘大实蝇的触角电位反应产生差异性。综上所述,本研究初次建立和优化了柑橘大实蝇的触角连接方法和GC-EAD技术,为昆虫活性化合物的筛选提供了新的研究思路。其中对不同品种的柑橘青果挥发物分析,为合理利用寄主植物挥发物对柑橘大实蝇实行生物防治提供了指导。采用GC-EAD技术筛选了柑橘大实蝇寄主植物挥发物的活性成分,为进一步开发柑橘大实蝇诱剂或趋避剂提供了可能。对柑橘大实蝇信息素的成分鉴定和行为验证,对柑橘大实蝇生物防治提供了新的潜在化合物。