润燥灵治疗干燥综合征的临床疗效观察及对模型小鼠Th1/Th2细胞的影响

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目的:  1.探讨中药润燥灵汤治疗干燥综合征(SS)的临床疗效。  2.通过构建SS模型小鼠,探讨中药润燥灵汤对SS模型小鼠Ⅰ型T辅助细胞(Th1)/Ⅱ型T辅助细胞(Th2)的调节作用。  方法:  1.临床研究:纳入符合诊断标准的SS患者60例,采用简单随机分组方法分为治疗组和对照组,各30例。治疗组给予中药润燥灵汤口服,对照组服用硫酸羟氯喹片(0.2g1次/日)口服,两组疗程均为3个月,治疗结束后评价2组患者中医证候学改善情况、实验室指标及疾病活动度指数评分的影响。  2.试验研究:把90只SPF级C57雌性小鼠随机分为6组,每组15只,分别为空白组、模型组、润燥灵汤高、中、低剂量和强的松对照组,除空白对照组外,其余各组均采用免疫诱导法建立SS模型。第5周开始分别灌服中药高、中、低剂量和强的松混悬液,空白对照组和模型对照组灌服等量生理盐水,连续灌胃治疗4周后,分别取小鼠颌下腺、肺、肾进行病理形态学观察;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中Th1细胞干扰素-γ(IFN-γ)和Th2细胞白介素-4(IL-4)的表达含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠颌下腺转录因子T-bet和转录因子GATA-3的表达水平;流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2细胞数量。  结果:  1.临床研究:2组中医症候疗效比较,治疗组总有效率86.7%,对照组总有效率46.7%,治疗组有效率高于对照组。对炎性指标的改善方面,两组治疗后均能降低ESR、CRP水平,治疗组还能降低IgG水平;两组治疗后ESR、CRP比较,无差异;而在降低IgG水平方面治疗组优于对照组。在疾病活动指数方面,两组治疗后,均能降低ESSDAI、ESSPRI评分;治疗组能明显降低ESSPRI评分,治疗组和对照组在降低 ESSDAI评分无差异;而在ESSPRI评分上治疗组优于对照组。  2.动物研究:造模两周后,在第3-4周各组小鼠饮水量均增加;治疗后,第5-6周润燥灵高剂量组和强的松组饮水量较模型组下降;在第7-8周,较模型组相比,润燥灵中、高、强的松组饮水量明显降低;逐渐接近空白组。模型组出现不同程度的颌下腺损害,中药高剂量和强的松具有减轻颌下腺炎症反应的作用。ELISA结果:SS模型小鼠IFN-γ和IL-4含量明显升高,治疗后,润燥灵高剂量组及强的松组能显著减少IFN-γ和IL-4含量。PT-PCR法:SS模型小鼠主要以T-bet含量升高为主,经治疗后,润燥灵高剂量组能在一定程度上减少T-bet的表达,进一步调节T-bet/GATA-3比值,使T-bet/GATA-3比值接近空白组。FCM结果:SS模型小组在CD4+T淋巴细胞中IFN-γ和IL-4所占比值明显升高,润燥灵高剂量组、强的松组IFN-γ所占比值降低;润燥灵高、中剂量组能IL-4所占比值降低,润燥灵高剂量组及强的松组明显降低IFN-γ/IL-4比值。  结论:  1.中药用润燥解毒、化瘀通络方法组成的润燥灵汤能有效的改善SS的主要临床症状及实验室指标、疾病活动指数。  2.润燥灵汤能够改善小鼠颌下腺功能,降低SS模型小鼠饮水量,下调IFN-γ、IL-4的表达,降低T-bet、GATA-3的含量,调节Th1/Th2的平衡。
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