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随着社会经济的发展、社会交流的频繁,酒精类饮料已逐渐成为人们常见的饮品之一；自1899年德国医生William Sullivan发现孕妇饮酒会影响胎儿以来,酒精对胎儿的毒理作用逐渐引起人们的关注。科学家们研究发现,酒精不仅影响胎儿生长发育,引成各脏器的畸形,而且严重损害胎儿中枢神经系统的发育。酒精可通过多种途径作用于中枢神经系统,多引起神经细胞发生程序性凋亡或自噬增加,造成神经细胞暂时性功能缺失,常见神经损伤部位包括海马和小脑,其中小脑受损将引起共济失调,而海马神经细胞缺失会引起近记忆丧失、认知障碍等。近年来研究发现,酒精可影响神经细胞的增殖,但其具体机制尚不十分清楚。我们利用神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(sphingomyelin synthase 2 knockout,SMS2-/-)小鼠建立孕期酒精暴露模型,试图从神经酰胺途径进一步研究酒精的神经毒理作用及其机制,为探讨酒精暴露、神经酰胺以及神经细胞增殖三者之间的相互联系提供理论依据,并为治疗和预防神经系统疾病引起的神经损伤提供新的治疗方略及方法。目的探讨神经酰胺在酒精诱导神经细胞增殖及新生神经元形成过程中的作用及其作用机制。方法利用SMS2-/-小鼠建立孕期酒精暴露模型,用酶学法检测PO仔鼠血清神经鞘磷脂(sphingomyelin, SM)水平,利用免疫荧光染色法观察各分组仔鼠齿状回神经细胞增殖、新生神经元及PKCα在脑组织中的表达,免疫印迹技术检测P7仔鼠海马组织PKCα蛋白的相对表达量。结果1.由于SMS2基因的缺失,SMS2-/-仔鼠血清SM水平明显低于野生型(Wildtype, WT)仔鼠(P<0.01)；无论是SMS2-/-仔鼠还是WT仔鼠,酒精暴露后其血清SM水平降低(P<0.05)且具有剂量依赖性(P<0.05)。2.无论是SMS2(?)仔鼠还是WT仔鼠,其齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元随年龄的增长而减少且一直持续到成年；与WT仔鼠相比,SMS2(?)仔鼠齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元较多(P<0.05)；酒精暴露后,两基因组仔鼠齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元随酒精剂量的增加而增多且酒精组明显多于对照组(P<0.01),高剂量组多于低剂量组(P<0.05),存在剂量依赖性。3.PKCα是C1P通路中重要的激活蛋白,其主要表达于胞膜,在海马、齿状回、脑皮质中均有表达；与WT仔鼠相比,SMS2-/-仔鼠海马组织PKCa蛋白的表达量较低(P<0.05)；酒精暴露后,两基因组仔鼠海马组织PKCα蛋白的表达量随酒精剂量的增加而增高(P<0.05)且具有剂量依赖性。结论SMS2基因的缺失使血清SM水平降低,可导致神经酰胺在神经细胞内蓄积；孕期酒精暴露能够诱导神经细胞发生代偿性增殖及新生神经元的形成,神经酰胺通路参与酒精诱导细胞增殖的过程；同时,PKCα是Cer-ClP级联反应中重要的激活蛋白,可上调神经酰胺调控酒精诱导神经细胞增殖及新生神经元形成的作用。