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目的:口腔内科常见牙髓疾病和根尖周病的最主要病因是细菌感染,根管治疗术是治疗此类疾病的主要方法。但该方法仍有20%~30%的失败率。导致根管治疗失败的主要原因是少量细菌存留于根管内,造成感染的持续存在。而粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)是再感染根管内最常检测到的细菌。由于粪肠球菌能通过遗传因子的转导迅速获得多重耐药,且能在营养物质缺乏、高碱性、抗菌药存在的恶劣环境中生存,所以在临床治疗中很难将其完全杀灭。因此,寻找一种既安全又能有效杀灭牙本质小管内粪肠球菌的消毒药物,对提高根管治疗术的效果具有重要意义。目前,临床常用的根管消毒药物有甲醛甲酚、樟脑酚及氢氧化钙制剂等,但这些药物在使用中或多或少的存有欠缺。中药来源广泛,具有独特的消炎、止痛、杀菌和解毒等功效,且毒副作用小。经长期实验和临床研究证实,许多中药(如黄连、大黄、黄芩等)对厌氧菌有较强的杀灭及抑制作用,并能中和、降解细菌产生的内毒素。本实验采用琼脂稀释法,用五味子、大黄、黄连、乌梅、连翘、黄芩等6种中药对32株粪肠球菌进行体外抗菌实验,探讨其抗菌效果,为临床应用中药进行根管消毒,杀灭粪肠球菌提供依据。
方法:称取中药饮片五味子、大黄、黄连、乌梅、连翘、黄芩各50g分别置于砂锅中,每种药加500ml水,浸泡并经两次熬制浓缩成50ml,高压灭菌得每毫升相当于原药材1g(1:1)的中药水煎剂。六味中药分别各用无菌试管11支,编号为1~11号。于第2~9号管中加入无菌生理盐水10ml,于1、2号管中加入1g/ml中药水煎剂10ml,第2支试管混合后取出10ml加入第三管,再混合后取10ml放入第4管,如此连续稀释至第9管取出10ml置于第10管中作为无菌阴性对照,第11管只有无菌生理盐水10ml作为无药阳性对照。采用无菌操作方法,将已融化的无菌M-H琼脂各16ml分装11瓶,并从1~11号管中各取4ml药液置于各琼脂瓶中,混合摇匀,倒入平板凝固后得不同含量的药物平板。再分别吸取1×104cfu.ml-1粪肠球菌接种于含不同药物的琼脂平板上,37℃培养24小时,观察各药物的最小抑菌浓度(MIC),计算MIC50、MIC90及累积抑菌率。
结果:六种中药五味子、大黄、黄连、乌梅、连翘、黄芩的水煎剂对体外的32株粪肠球菌有不同程度的抑制作用,同一种中药对粪肠球菌的不同菌株表现出相近的抑菌活性。在固体培养基中,中草药水煎剂抑制粪肠球菌的效果随药液的浓度的增加而增加。其中黄连效果最好,其MIC90为1:320(3.125mg/ml)(p<0.05);效果较好的有五味子、大黄、连翘,MIC90分别为1:40(25mg/ml)、1:20(50mg/ml)、1:40(25mg/ml)(p<0.05)。
结论:黄连、五味子、大黄、连翘水煎剂体外对粪肠球菌有较好的抑菌效果,其中黄连水煎剂抑菌效果最好。乌梅、黄芩作用较弱。