黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

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目的:研究黑青稞籽皮提取物后处理对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制。方法:用Na2S2O4作耗氧剂建立H9c2细胞化学性缺氧/复氧损伤模型。将H9c2细胞随机分为5组:正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、缺氧/复氧+低、中、高剂量提取物组(H/R+L、M、H组)。应用MTT法检测细胞相对活力,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ROS水平和细胞线粒体跨膜电位(△Ψm), Western blot检测相关蛋白(Akt、pAkt、Bcl-2和Bax)表达变化。数据统计采用SAS9.2和SPSS19.0软件包进行统计学处理。结果:1.通过将H9c2细胞置于5mM Na2S2O4中使细胞缺氧20min,再复氧8h建立了稳定、可靠的缺氧/复氧损伤模型。2.缺氧/复氧降低H9c2细胞相对活力,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞相对活力的下降。3.缺氧/复氧诱导H9c2细胞凋亡,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞凋亡。4.缺氧/复氧增加H9c2细胞内ROS水平,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞内ROS水平的增加。5.缺氧/复氧降低H9c2细胞线粒体跨膜电位,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞线粒体跨膜电位的下降。6.缺氧/复氧降低H9c2细胞pAkt、Bcl-2的表达,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞pAkt、Bcl-2表达的降低。各组细胞Akt、Bax的表达无明显差异。结论:黑青稞籽皮提取物后处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,可能通过抑制缺氧/复氧所致细胞内ROS水平的增加,抑制细胞线粒体跨膜电位的下降,进而减少心肌细胞凋亡。其保护作用可能与激活PI3K/Akt/Bcl-2通路相关。
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