乳腺癌转移抑制基因1 (Breast cancer Metastasis Suppressor 1, BRMS1),定位于染色体11q13,是肿瘤转移抑制基因家族的成员之一。研究发现在乳腺癌、黑色素瘤以及卵巢癌中BRMS1蛋白能显著抑制肿瘤转移而不影响原发肿瘤的生长。但是,BRMS1与肝癌的联系还鲜有报道。我室的前期工作发现BRMS1在高转移性的肝癌细胞系中表达丢失,且BRMS1在肝癌组织中的表达水平显著低于相邻的癌旁正常组织。在肝癌细胞系中过量表达BRMS1能够促进肝癌细胞的凋亡,而干扰肝癌细胞的内源BRMS1能够提高细胞对凋亡信号的抵抗能力。这些研究发现初步提示了BRMS1与肝癌发生发展的功能联系。在本论文中,我们发现了一个新的BRMS1剪接异构体,BRMS1-Vh。序列分析发现这个新的剪接异构体缺少了第7号外显子,相应的蛋白质序列中缺少了一个BRMS1入核所需的核定位信号。我们首先通过构建大分子量荧光融合蛋白进行了细胞亚定位实验,发现新剪接体的入核能力确实发生了下降,进一步的核质分离实验又发现BRMS1-Vh的确在细胞质内分布较多。为了分析新剪接体的生物学功能,我们首先检测了该剪接体调节NF-kB通路的活性。实验发现与主要剪接本BRMS1-V1相比,BRMS1-Vh对p65亚基入核的抑制作用更强。BRMS1-Vh也能与HDAC1、HDAC3相互作用并促进p65的去乙酰化,且BRMS1-Vh的去乙酰化作用比BRMS1-V1更强。双荧光报告实验则继续证明BRMS1-Vh不仅能抑制NF-kB启动子的活性,且其抑制作用比BRMS1-V1更强。过量表达BRMS1-Vh能降低细胞内OPN、Bcl-xL、 cIAP-2等NF-kB通路下游基因的转录水平。在细胞表型方面,瞬转BRMS1-Vh能降低细胞的克隆形成率。在饥饿条件下,稳定表达BRMS1-Vh的细胞的周期不发生改变,但生长速度下降,提示了BRMS1-Vh的促凋亡作用。而且BRMS1-Vh的表达能促进TNFR诱导的细胞死亡。将稳定表达BRMS1-Vh的细胞株接种裸鼠腋下记录肿瘤细胞的体内生长速率,发现稳定表达BRMS1-Vh的细胞能显著抑制肝癌细胞移植瘤的原位生长。综上所述,本论文克隆了BRMS1的一个新的剪接异构体,并对其在肝癌细胞中的生物学功能进行了初步研究。与BRMS1-V1相比,BRMS1-Vh更倾向于滞留在细胞质中,对NF-kB通路具有更强的抑制作用,并能在体外促进细胞凋亡,在体内抑制肿瘤生长。这一发现增强了我们对BRMS1的功能了解,也为肝癌的临床辅助诊断和防御治疗提供了重要的理论支持。