结核分枝杆菌(M.tuberculosis)是一种独特的病原菌,其DNA复制调控具有独一无二的特点,但具体的机制目前还很不清楚。因此,对其复制相关蛋白之间及蛋白与DNA等复制因子之间的相互作用展开深入研究,将有利于揭示此类病原菌DNA复制调控的特殊机制并可能发现潜在的药物新靶标。在本研究中,我们从MtbDnaB和MtbDnaE2这两个DNA复制关键蛋白出发,在对M.tuberculosis H37Rv基因文库进行筛选发现相互作用蛋白的基础上,详细研究了两个重要的复制蛋白MtbDnaA与MtbDnaB及复制原点之间的相互作用。主要取得了以下几方面的研究结果:(1)通过细菌双杂交实验初步筛选到许多与MtbDnaB和MtbDnaE2相互作用的蛋白质,其中包括MtbDnaA与MtbDnaB的相互作用。(2)采用细菌双杂交、Pull-Down和SPR等技术进一步确定MtbDnaA与MtbDnaB之间的相互作用位点。(3)利用SPR和EMSA技术发现MtbDnaB的N末端结构域能抑制MtbDnaA结合全长复制原点的能力,但不直接影响MtbDnaA的局部DnaA box结合能力。(4)初步鉴定了MtbDnaE2与MtbDnaN之间的相互作用。因此,本研究首次深入研究了MtbDnaA、MtbDnaB及复制原点等DNA复制起始因子之间的相互作用及调控关系,初步探索了MtbDnaN和MtbDnaE2之间的相互作用。我们的这些工作对于进一步认识结核分枝杆菌DNA复制及感染机制和寻找新的药物靶标提供了重要线索。