目的:　　本课题通过体外实验探讨奈达铂(NDP)、藤黄酸(GA)对顺铂(DDP)耐药非小细胞肺癌细胞株(A549/DDP)作用及其机制，旨在为筛选有效抗肿瘤药物和制定更加有效的顺铂耐药非小细胞肺癌治疗方案提供实验依据。　　方法:　　1.应用MTT方法研究DDP、NDP、GA单药以及DDP联合GA对A549/DDP细胞的生长抑制情况。　　2.应用等辐射分析方法进行DDP和GA联合作用与DDP、GA单药作用的差异分析比较。　　3.应用流式细胞术检测各单药或组合对A549/DDP细胞凋亡与细胞周期的影响。　　4.应用细胞免疫组织化学法定性及定位检测DDP、NDP、GA单药以及DDP联合GA处理A549/DDP后的P-gp、P53、Bcl-2及Bax的表达。　　5.应用蛋白质印迹法定量检测DDP、NDP、GA单药以及DDP联合GA处理A549/DDP后的P-gp、P53、Bcl-2及Bax的表达　　结果:　　1.在A549/DDP和A549细胞中，DDP的IC50(23.36±1.41μg/ml、2.53±0.12μg/ml)具有明显差异(P＜0.001)，显示A549/DDP细胞的耐DDP的特性。　　2.在A549/DDP细胞中， NDP的 IC50(19.97±0.88μg/ml)与 DDP的IC50(23.36±1.41μg/ml)具有统计学差异(P=0.024)。NDP作用使A549/DDP细胞产生明显G2期阻滞(P=0.005);也较DDP显著促进A549/DDP细胞早期及晚期凋亡(P=0.010、P=0.005)。　　3.根据等辐射分析法，较低浓度DDP联合GA即可对A549/DDP细胞增殖产生50％抑制率（8.47±0.94:0.4μg/ml和4.58±0.95:0.8μg/ml）。DDP联合GA作用较DDP、GA单药亦可明显诱导A549/DDP细胞产生G2期阻滞(P=0.02、P=0.012);亦可明显提高A549/DDP细胞早期及晚期凋亡率(P=0.015，P=0.015;P=0.005，P=0.010)。　　4.NDP作用下的A549/DDP细胞P-gP、P53及Bcl-2表达较DDP作用明显降低(P=0.014;P=0.020;P=0.008)，而Bax表达显著增加(P=0.024)，其中以Bcl-2表达降低最显著(P=0.020); DDP联合GA作用下的A549/DDP细胞P-gP、P53及Bcl-2表达较DDP、GA单药作用明显降低(P=0.006，P=0.017;P＜0.01，P=0.001;P=0.007，P=0.004)，Bax表达增加(P=0.006，P=0.007)，其中以P53表达降低最显著(P＜0.01，P=0.001)。　　5.ERCC1在A549及A549/DDP细胞中均有表达，且表达无明显差异。　　结论:　　1、NDP对A549/DDP细胞有明显的抑制细胞生长、阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡的作用。　　2、较低浓度的DDP联合GA即可对A549/DDP细胞产生明显的抑制生长、细胞周期阻滞及诱导凋亡作用，两者具有协同抗肿瘤作用。　　3、NDP及GA联合DDP可能通过抑制P-gP表达、调节Bcl-2及Bax表达以及可能下调突变型P53表达，以减弱肿瘤细胞泵出抗癌药物及DNA修复能力，增强肿瘤细胞促凋亡作用，达到拮抗A549/DDP的目的。其中NDP以下调Bcl-2的表达为主，而DDP联合GA则以下调突变型P53的表达更明显。　　4、目前免疫组织化学法检测ERCC1表达尚不能预测铂类药物治疗的敏感性，寻求特异性的ERCC1免疫组织化学检测抗体及其他有效的检测方法是未来重要的发展方向。