鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎模型大鼠Th1/Th2细胞及相关细胞因子影响研究

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目的变应性鼻炎是由IgE介导的变态反应性疾病,是最常见的上呼吸道疾病,近年来患病率明显升高。尽管该病不会危及生命,但患病人数众多,除导致鼻部和眼部等局部器官症状外,它还可诱发支气管哮喘等多种并发症,对个人和社会产生严重影响。中医药治疗变应性鼻炎有一定优势,鹿鹅鼻炎方为我们临床上治疗变应性鼻炎常用方剂,目前对其作用机制尚不清楚。通过卵清蛋白致敏建立变应性鼻炎大鼠模型,研究鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎大鼠的治疗作用,进一步探讨其对Th1、Th2细胞的调控作用,为鹿鹅鼻炎方的临床使用提供理论依据。方法将60只SD大鼠,随机分为6组:空白对照组、模型对照组、西药对照组、高剂量中药组、中剂量中药组、低剂量中药组,每组10只。采用卵清蛋白致敏的方法建立变应性鼻炎大鼠模型,模型建立以后分别给予相应的药物干预,连续治疗14天后处死大鼠,取血清和鼻黏膜组织,分别运用ELISA法检测血清中OVA-sIgE、IL-4及IFN-y含量,HE、PAS及A&S染色法观察鼻黏膜组织病理形态改变及检测肥大细胞和杯状细胞数目的变化,免疫组化技术检测鼻黏膜组织中IL-4及IFN-y表达情况,western-blot和RT-PCR法检测鼻黏膜组织中Th1、Th2细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3基因的表达情况。结果1)造模后,模型对照组和各治疗组大鼠行为学评分均大于5分,高于空白对照组(p<0.05)。治疗后,各治疗组大鼠行为学评分低于模型对照组,差异有统计学意义;2.空白对照组大鼠鼻黏膜组织病理形态学表现为假复层纤毛柱状上皮结构完整、平滑,无炎症反应相关表现;模型组大鼠鼻黏膜上皮脱落、坏死而不连续,炎细胞浸润,组织间隙出血,腺体增生、肿胀,杯状细胞增生,黏膜表面分泌物增多;西药对照组大鼠鼻黏膜基本恢复正常,无明显炎症表现;鹿鹅鼻炎方组大鼠鼻黏膜较模型组有明显改善,仅有少量炎细胞浸润和局部黏膜上皮细胞的脱落。模型对照组大鼠鼻黏膜组织中肥大细胞、杯状细胞数目较空白组、治疗组增高,有统计学差异。3.血清ELISA检测,与空白组比较,模型组IgE、IL-4含量升高,IFN-γ含量降低;治疗后,与模型组比较,治疗组IgE、IL-4含量降低,IFN-γ含量升高。4.免疫组化检测,与空白组比较,模型组IL-4表达增强,IFN-γ表达降低;治疗后,与模型组比较,治疗组IL-4表达降低,IFN-γ表达增强。5.Western blot检测,与空白组比较,模型组GATA-3表达增强,T-bet表达降低;治疗后,与模型组比较,治疗组GATA-3表达降低,T-bet表达增强。6.RT-PCR检测,与空白组比较,模型组GATA-3表达增强,T-bet表达降低;治疗后,与模型组比较,治疗组GATA-3表达降低,T-bet表达增强,与Western blot结果一致。结论1)鹿鹅鼻炎方可以有效缓解变应性鼻炎大鼠流涕、喷嚏、挠鼻等症状,降低血清中IgE含量,减轻鼻部炎症反应,对变应性鼻炎大鼠起到治疗作用。2)鹿鹅鼻炎方可以降低变应性鼻炎大鼠Th2细胞因子IL-4含量,升高Thl细胞因子IFN-γ含量,纠正Thl/Th2细胞失衡,缓解其免疫变态反应;其作用机制可能是通过下调Th2特异性转录因子GATA-3的表达,促进Thl特异性转录因子T-bet的表达,调控Thl/Th2细胞,逆转以Th2细胞免疫反应占主导的免疫失衡。
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