【摘 要】
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目的:研究乙肝病毒X蛋白(HBX)在肝脏卵圆细胞中通过AKT信号对c-Jun蛋白表达的调节作用。方法:1.通过荧光显微镜、细胞免疫荧光、Western Blot鉴定HBX蛋白在pEGFP-HBX-LE6细胞
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目的:研究乙肝病毒X蛋白(HBX)在肝脏卵圆细胞中通过AKT信号对c-Jun蛋白表达的调节作用。方法:1.通过荧光显微镜、细胞免疫荧光、Western Blot鉴定HBX蛋白在pEGFP-HBX-LE6细胞中的表达。2.将pEGFP-HBX-LE6卵圆细胞作为实验组,L02-HBX细胞作为阳性对照组,LE6卵圆细胞、转染空载体的pEGFP-LE6卵圆细胞为一般对照组。通过Western Blot技术检测p-Akt、AKT和c-Jun的蛋白表达水平。3.用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002阻断PI-3K/AKT信号通路,通过Western Blot技术检测在AKT通路被抑制后c-Jun蛋白水平的变化。结果:1.稳定转染HBX基因的pEGFP-HBX-LE6及转染空载体的pEGFP-LE6卵圆细胞株在荧光显微镜下可见绿色荧光;HBX蛋白在pEGFP-HBX-LE6细胞中有表达;细胞免疫荧光显示HBX在pEGFP-HBX-LE6卵圆细胞中表达,且主要位于细胞核。2.p-Akt、c-Jun蛋白在pEGFP-HBX-LE6细胞中表达上调。3.AKT通路被抑制后,HBX上调的c-Jun蛋白在pEGFP-HBX-LE6中随之下调。结论:HBX在肝脏卵圆细胞中上调AKT信号及c-Jun的蛋白表达,并且HBX蛋白可通过AKT信号上调c-Jun蛋白的表达。
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