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目的:研究清肠栓及其主药(青黛、参三七)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的活动期溃疡性结肠炎大鼠zonulin信号通路的影响,观察上述药物对活动期溃疡性结肠炎的治疗效果,并探究其具体的作用机制。 方法:将50只SD大鼠根据体重随机分成5组:正常对照组(C)、模型对照组(M)、清肠栓组(QCS)、参三七组(S),青黛组(Q)。除正常对照组外,所有SD大鼠自由饮用6d5% DSS以诱导溃疡性结肠炎模型,之后分别予清肠栓、青黛、参三七灌肠治疗7d。实验期间,计算每只大鼠的DAI评分。用药结束后,HE染色观察结肠黏膜形态并进行组织损伤学评分;荧光分光光度计检测结肠组织FD4水平;免疫荧光检测结肠组织紧密连接蛋白ZO1表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中zonulin蛋白水平;Western-blot检测结肠组织中zonulin蛋白表达水平;实时定量PCR(RT-PCR)检测结肠组织中zonulin、EGFR、PAR2、PKCa、DAG mRNA的相对表达量。 结果:1.一般情况显示:自由饮用6d5% DSS能成功诱导出腹泻、便血、体重下降的溃疡性结肠炎模型。2.DAI评分显示:模型对照组与正常对照组相比DAI评分显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。用药干预后清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比DAI评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),其中清肠栓组和参三七组改善最为显著。3.组织损伤学评分显示:模型对照组与正常对照组相比组织损伤学得分明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。用药干预后清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比组织损伤学评分明显降低,差异有统计学意义(p<0.01),其中清肠栓组和青黛组改善最为显著。4.免疫荧光显示:模型对照组与正常对照组相比大鼠结肠组织中紧密连接蛋白ZO1表达明显下调,用药干预后清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比明显上调,其中以清肠栓组上调最为显著。5.FD4检测显示:模型对照组与正常对照组相比,大分子物质异硫氰酸荧光素(FD4)的透过率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。用药干预后清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比出现明显下调趋势,其中清肠栓组下调最为明显,差异有统计学意义(P<0.05),青黛组及参三七组尚无统计学意义(P>0.05)。6.ELISA检测显示:用药干预后清肠栓组、青黛组、三七组与模型对照组相比血清zonulin含量显著下调,差异有统计学意义(P<0.05),其中清肠栓组及青黛组下调最为显著。7.Western-blot检测显示:模型对照组与正常对照组相比,大鼠结肠组织中zonulin蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。用药干预后清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比,大鼠结肠中的zonulin蛋白表达明显下调,差异亦有统计学意义(P<0.05),其中清肠栓组下调最为显著。8.RT-PCR检测显示:模型对照组与正常对照组相比,大鼠结肠组织中EGFR、PAR2、PKCa、DAG mRNA的相对表达均上调,差异有统计学意义(P<0.01)。用药干预后,清肠栓组、青黛组、参三七组与模型对照组相比均显著下调,差异有统计学意义(P<0.01),其中EGFR、PKCa的表达清肠栓和参三七下调最为显著,zonulin、PAR2、DAG的表达清肠栓和青黛组下调最为显著。 结论:综上结果表明,清肠栓及其主药(青黛、参三七)对DSS诱导的溃疡性结肠炎疗效显著,能有效改善大鼠结肠组织的通透性,其具体机制与zonulin通路的调节作用有关。