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目的:应用青蒿琥酯(ART)处理高糖条件下血管内皮细胞,以探讨青蒿琥酯对高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白表达的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)作为实验对象,分为葡萄糖(Glucose,G)组、40mmol/L G+ART(G40+ART)组,甘露醇(Mannitol,M)对照组、G40+二甲基亚砜(DMSO)对照组,其中葡萄糖组浓度梯度分为5.5mmol/L G(G5.5)、25mmol/L G(G25)、40mmol/L G(G40);甘露醇对照组浓度梯度为5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5mmol/L M(M40),G40+ART组中依据ART浓度梯度分为G40+10ug/ml ART(10A)、G40+20ug/ml ART(20A)、G40+40ug/ml ART(40A);DMSO对照组中DMSO用量与40A组中溶解ART所用DMSO体积相同。采用Western blot、细胞免疫荧光技术分别检测各组细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达情况。结果:1.高糖条件对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响,及ART对高糖条件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响。应用G5.5,G25,G40的培养液处理细胞,Western blot结果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G25组较G5.5组表达升高,且G40组较G25组表达升高,差异有统计学意义(均为P<0.01)。细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G25组较G5.5组表达升高,且G40组较G25组表达升高。应用10A,20A,40A三种药物浓度对细胞进行处理,同时保证细胞培养过程中药物浓度以外的其他培养条件相同。Western blot结果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART组较G40组表达下降,其中,10A组低于G40组,20A组低10A组,40A组低于20A组,差异有统计学意义(均为P<0.01),细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART组较G40组表达下降,其中,10A组低于G40组,20A组低10A组,40A组低于20A组。2.高渗透压对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响。对于M对照组,应用含有5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5 mmol/L M(M40)的培养液处理细胞,分别与G25组、G40组相比,Western blot结果显示ICAM-1、MMP-9蛋白表达在G25组较M25组表达升高,G40组较M40组表达升高,差异有统计学意义(均为P<0.01)。细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白表达在G25组较M25组表达升高,G40组较M40组表达升高。3.为进一步证明ART对高糖条件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响,设置DMSO对照组。DMSO对照组中DMSO用量与40A组中溶解ART所用DMSO体积相同,Western blot结果显示G40+ART组ICAM-1、MMP-9蛋白表达低于DMSO组,差异有统计学意义(均为P<0.01)。细胞免疫荧光检测结果显示G40+ART组ICAM-1、MMP-9蛋白表达低于DMSO组。结论:1.ICAM-1和MMP-9蛋白在高糖条件下表达升高,且具有浓度依赖性。2.高渗透压对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达无明显影响。3.ART可抑制高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表达,且具有浓度依赖性。4.本实验在细胞水平证明ART可抑制高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表达,为进一步研究ART抑制视网膜新生血管形成和渗漏的机制中ICAM-1和MMP-9表达变化奠定基础