纳米材料及适配体功能化的磁性粒子电化学发光生物传感器

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(1)合成了Fe3O4/Au磁性纳米粒子,根据单链寡聚核苷酸(以下简称DNA,ss-DNA)杂交的原理,利用量子点电化学发光,构建了DNA电化学传感器。在磁控玻碳电极(MCGCE)表面,将5’-SH-ssDNA捕获探针自组装在Fe3O4/Au磁性纳米粒子上,然后与目标DNA互补的一端杂交形成dsDNA,再与双标记了量子点的5’-NH2-ssDNA-NH2-3’信号探针杂交形成三明治杂交的DNA。通过采用量子点双标记法,使检测的灵敏度显著提高。在1.0×10-131.0×10-11mol/L范围,目标DNA浓度与其响应的ECL信号呈线性关系,检出限为1.8×10-14mol/L。(2)合成了聚二乙基三胺五乙酸乙二醇酯(PDTPA-EG)、PDTPA-EG@CdTe纳米复合物,根据单链寡聚核苷酸(以下简称DNA,ss-DNA)杂交的原理,利用量子点电化学发光,构建了DNA电化学传感器。在磁控金电极(MCGE)表面,将5’-SH-ssDNA捕获探针自组装在Fe3O4/Au磁性纳米粒子上,然后与目标DNA互补的一端杂交形成dsDNA,再与3’-NH2-ssDNA信号探针杂交形成三明治杂交的DNA;最后修饰上PDTPA-EG@CdTe纳米复合物。在1.0×10-161.0×10-14mol/L范围,目标DNA浓度与其响应的ECL信号呈线性关系,检出限为3.0×10-17mol/L。由于采用PDTPA-EG@CdTe标记,检测的灵敏度显著提高。(3) Fe3O4/Au磁性纳米粒子表面修饰一层发夹结构适配子探针(Fe3O4/Au-Aptamer);当加入Pb2+时促使发夹结构适配子的“颈-环”结构被打开,形成G4螺旋,暴露出3’-NH2使之与CdTe量子点结合;构建了量子点电化学发光“Turn on”型Pb2+传感器。在2.0×10-101.0×10-8mol/L范围,Pb2+浓度与其响应的ECL信号呈线性关系,检出限为1.08×10-11mol/L。此外,该生物传感器显示出很好的选择性、稳定性及重现性。(4)在Fe3O4/Au磁性纳米粒子表面修饰一层双链(dsDNA)适配子探针(Fe3O4/Au-dsDNA)并将Ru(phen)32+插入dsDNA结构中;加入Pb2+时促使dsDNA的双链结构打开,形成Fe3O4/Au-G4-Pb2+结构,解离出单链DNA(ssDNA)和Ru(phen)32+;当加入Pb2+的强力螯合剂EDTA时,两条ssDNA重新杂交成dsDNA结构,Ru(phen)32+再次插入dsDNA结构中;赋予了传感器很好的再生性。根据磁性纳米粒子分离富集在磁控金电极(MCGE)表面;利用Ru(phen)32+电化学发光,构建了Pb2+电化学发光传感器。在5.0×10-119.0×10-9mol/L范围,Pb2+浓度与其响应的ECL信号呈线性关系,检出限为1.05×10-12mol/L。此外,该生物传感器显示出很好的选择性、稳定性、重现性及再生性。
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