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内皮细胞位于血管最内层,持续不断得暴露于血液流动产生的血流应力的作用下。内皮细胞具有多种生理功能,其结构和功能的改变对血液流动性、血管张力及通透性调节方面都有影响,严重时引发病变。血液流动产生的剪切力(Fluid Shear Force或Shear Force)就是影响血管内皮细胞形态和功能的重要因素之一。原癌基因是在内皮细胞受刺激后短时间内通过一定的信号转导通道而诱导其表达的,近年来,原癌基因在国际上越来越引起关注。所以,为了探索剪切力对内皮细胞原癌基因表达的影响,我们以体外培养的人脐静脉内皮细胞为研究对象,借助平行板流动小室装置,利用免疫组织化学方法及计算机图象处理研究了内皮细胞原癌基因c-fos和c-myc蛋白在不同的剪切力作用下随时间的表达规律。这对于进一步探究内皮细胞通过何种信号传导途径将剪切力信号和刺激传入内皮细胞内并引起一系列的细胞应答和认识流动剪切力作用对血管内皮细胞功能、代谢等产生的影响以及对某些疾病的早期诊断等都有重要意义。 我们的研究发现内皮细胞原癌基因c-fos蛋白表达在静态(无剪切力作用)时非常低,当施加剪切力后可诱导c-fos蛋白水平迅速增加。在我们实验中分别施加了4dynes/cm~2和10 dynes/cm~2两种剪应力。当剪应力大小为4 dynes/cm~2时,c-fos蛋白表达量随作用时间的延长而增加,到1.0小时达到高峰,与对照组相比有极显著差异(p<0.001),随后下降,2.5小时时接近基础水平(对照组水平)。当剪应力大小是10 dynes/cm~2时,随时间的变化规律同剪应力为4 dynes/cm~2,但表达量较其大,说明c-fos蛋白表达具有剪切力作用时间和剪切力大小依赖性。 同时,我们也发现c-myc蛋白在静态时表达也非常低,经剪切力作用后缓慢增加,c-myc蛋白水平明显较c-fos低(p<0.05),而且剪应力为4 dynes/cm~2和10 dynes/cm~2两种情况对c-myc蛋白表达的影响无明显差异,其高峰在1.5小时,与对照组相比有显著差异(p<0.05),随后下降在2.5小时时接近基础水平。说明c-myc蛋白表达具有剪切力作用时间的依赖性。实验同时发现剪切力过大或作用时间过长都可导致内皮细胞皱缩、损伤和脱落。 以上的研究证实细胞在受剪切力作用后可通过一定的信号转导途径使c-fos蛋白和c-myc蛋白表达增加。而且,不同剪切力,即剪切力作用大小、持续时间不同,对其表达的调节也不同。因为原癌基因确实与人正常生理功能的发挥和一些疾病的发展有密切的联系。所以,我们的研究可能对于未来临床研究和一些疾病的诊断提供了有意义的线索。