目的:本研究运用免疫组织化学、Western blotting及间接免疫荧光组织化学等技术,检测未孕及妊娠小鼠子宫内膜activeβ-catenin蛋白的表达、分布规律、动态变化以及对胚胎着床的影响,有助于从分子水平探讨activeβ-catenin在胚胎着床过程中的分子调控机制,为了解人类正常生殖过程机制和生殖方面疾病的诊断、治疗奠定基础。方法:1.建立昆明种小鼠妊娠动物模型,随机将孕鼠分为5组作为实验组,未孕小鼠作为对照组,收集未妊娠(d0)和妊娠第3天(d3)、第4天(d4)、第5天(d5)、第6天(d6)、第7天(d7)的子宫内膜组织,分别于-80℃冻存备用。2.运用免疫组织化学和间接免疫荧光组织化学检测activeβ-catenin在小鼠子宫内膜的表达部位及规律。3.运用Western blotting法检测activeβ-catenin蛋白在小鼠子宫内膜表达水平。4.于妊娠d2天,实验组小鼠颈背部皮下注射用1,3-丙二醇配制的米非司酮混悬液,对照组包括载剂对照组(颈背部皮下注射1,3-丙二醇)和妊娠对照组,于妊娠d3、d4、d5、d6、d7天观察子宫内膜activeβ-catenin的表达变化。结果:1.免疫组织化学结果显示,activeβ-catenin蛋白在妊娠与未妊娠小鼠子宫内膜均有表达,但妊娠子宫内膜表达activeβ-catenin明显升高(P <0.05),且于妊娠d3天在腺上皮和腔上皮、基质细胞膜表达;妊娠d4天在腺上皮、基质细胞表达增加,在腔上皮表达强烈;孕娠d5天后表达在血管内皮、基质细胞膜和核,腔上皮表达减弱或消失,并大量表达在胚胎和初级蜕膜带。2.间接免疫荧光组织化学结果显示,activeβ-catenin蛋白在妊娠与未妊娠小鼠子宫内膜均有表达,但妊娠子宫内膜表达明显高于未妊娠。妊娠d4天达到最高峰,与妊娠d4天相比,妊娠d5、d6、d7略有下降,但无显著性意义(P>0.05)。activeβ-catenin蛋白蓝色荧光阳性信号定位于子宫内膜腺上皮、腔上皮的胞浆以及基质细胞的胞浆和胞核中。activeβ-catenin与E-钙粘素在妊娠d3,d4天的子宫内膜腺上皮和腔上皮、基质细胞膜上有共定位表达,activeβ-catenin与VEGF于妊娠d5天后共表达在基质细胞和血管内皮。3. Western blotting结果与免疫组织化学、间接免疫荧光组织化学结果一致,activeβ-catenin(92kDa)在小鼠胚胎着床前后存在持续表达,表达高峰在妊娠d4天,妊娠d5后表达量有所下降但仍高于着床前水平。4.小鼠颈背部皮下注射米非司酮实验显示,妊娠d3～d7天,米非司酮组小鼠activeβ-catenin蛋白的表达较妊娠对照组(仅注射载剂)显著降低(p<0.05),在妊娠d4天activeβ-catenin表达量未见明显升高,且表达部位局仅限于基质细胞,在腔上皮无表达。结论1. activeβ-catenin蛋白在未孕及早孕小鼠子宫内膜均有表达,并且妊娠小鼠子宫内膜Activeβ-catenin的表达明显高于未孕小鼠子宫内膜,提示activeβ-catenin可能在胚胎着床过程中扮演重要的角色。2. activeβ-catenin在着床窗口期的高表达以及在小鼠子宫内膜的分布变化,提示activeβ-catenin可能参与了胚胎着床最初的黏附过程,通过促进细胞-细胞外基质的黏附而使子宫内膜容受性达到最佳状态,从而影响滋养层细胞与子宫内膜的相互作用以利于胚胎着床。并在着床后通过对基质的降解、滋养层的侵袭以及新生血管形成的影响而维持正常妊娠。3.孕激素受体拮抗剂米非司酮显著抑制activeβ-catenin在子宫内膜的表达,且在妊娠d4天未见子宫腔上皮的强烈表达。提示其可能在胚胎着床的黏附过程中扮演重要角色。且activeβ-catenin的表达可能受到孕激素的正向调节。