论文部分内容阅读
背景有机磷农药广泛用于农业,文献报道长期低剂量接触有机磷可引起血管功能障碍,加速动脉粥样硬化的形成与其他心血管有关的疾病。流行病学显示,慢性有机磷暴露会导致神经认知功能受损。关于水胺硫磷对于子代的影响虽然有文献报道,但是作用机制尚不清楚。本研究意在观察维生素B6（Vitamin B6,VitB6）在水胺硫磷诱导子代大鼠大脑后动脉损伤中的作用,初步探讨其机制。目的观察水胺硫磷作用于大鼠后,是否对子代大鼠大脑后动脉结构和功能有损伤。VitB6能否抑制水胺硫磷对子代大鼠大脑后动脉的损伤,并探讨1-磷酸鞘氨醇（Sphingosine 1-phosphate,S1P）受体是否参与VitB6抑制水胺硫磷诱导的子代大鼠大脑后动脉的损伤。方法4周龄健康Sprague-Dawley（SD）大鼠,雌性120只、雄性60只。分为生理盐水（Saline）组、Vitamin B6（VitB6）组、芬戈莫德（Fingolimod）组、水胺硫磷（Isocarbophos）组、水胺硫磷+VitB6（Isocarbophos+VitB6）组、水胺硫磷+VitB6+芬戈莫德（Isocarbophos+VitB6+Fingolimod）组。每组10只雄鼠和20只雌鼠。雌鼠按照分组造模16周后合笼,对子代大鼠饲养8周后每组随机选取8只进行试验。（1）取子代大鼠动脉血做血气分析;（2）取子代大鼠血浆和大脑后动脉组织检测氧化性指标、炎症因子;（3）取子代大鼠大脑后动脉观察形态学、检测功能变化及Casepase-3表达;（4）取子代大鼠血浆和大脑后动脉组织检测S1P受体的表达;（5）应用免疫荧光和Western blot检测子代大鼠大脑后动脉血管S1P受体亚型S1P1、S1P2的表达;（6）采用SPSS 20.0统计软件进行分析,所有计量结果均采用均数±标准差（Standard Deviation,SD）表示,多组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）,P<0.05具有统计学意义。结果（1）与生理盐水组相比,水胺硫磷组子代大鼠大脑后动脉形态出现明显损伤,血管舒张功能显著降低（P<0.05）,与水胺硫磷组相比,VitB6干预组明显改善了子代大鼠大脑后动脉结构,升高了血管舒张功能,与芬戈莫德共同作用时,VitB6的改善作用不明显。（2）与生理盐水组相比,水胺硫磷组子代大鼠CO2总量、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、细胞间粘附因子（Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）、血管间粘附因子（Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）、白细胞介素-1（Interleukin-1,IL-1）、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）含量和Caspase-3的表达明显升高,与水胺硫磷组相比,VitB6干预组使子代大鼠血气中CO2总量、血浆和血管组织中MDA含量、ICAM-1、VCAM-1、IL-1、IL-6的含量和Caspase-3的表达显著降低（P<0.05）,与芬戈莫德共同作用时,VitB6的降低作用不明显;（3）与生理盐水组相比,水胺硫磷组子代大鼠一氧化氮（Nitric oxide,NO）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）含量明显升高（P<0.05）,与水胺硫磷组相比,VitB6干预组NO、SOD含量显著降低（P<0.05）,与芬戈莫德共同作用时,VitB6的降低作用不明显;（4）与生理盐水组相比,水胺硫磷组子代大鼠血浆和大脑后动脉组织S1P含量显著降低（P<0.01）,与水胺硫磷组相比,VitB6使子代鼠血浆和大脑后动脉组织S1P含量显著增多（P<0.05）,与芬戈莫德共同作用时,VitB6的升高作用不明显;（5）水胺硫磷使子代大鼠大脑后动脉S1P1和S1P2的表达均降低,S1P1降低更为显著（P<0.01）;VitB6对水胺硫磷引起的损伤有抑制作用,芬戈莫德可阻断S1P1受体,VitB6与芬戈莫德同时作用时,VitB6的抑制作用明显降低（P<0.05）。结论（1）长期低剂量的给母鼠水胺硫磷灌胃能诱导子代大鼠大脑后动脉血管损伤;（2）VitB6能抑制水胺硫磷诱导的子代大鼠大脑后动脉的损伤,抑制作用可能与S1P1受体有关。