研究目的探究大鼠坐骨神经挤压伤后神经干细胞条件培养液(NSC-CM)的修复作用,并观察其对损伤神经中炎症因子表达及巨噬细胞浸润的影响,在体外进一步阐明NSC-CM对巨噬细胞炎症状态的影响及其机制探究。研究方法(1)SD大鼠坐骨神经挤压伤模型的建立;(2)通过坐骨神经功能指数,足印分析脚趾伸展情况,腓肠肌湿重和HE染色观察NSC-CM对大鼠坐骨神经挤压伤后行为学和功能恢复的影响;(3)通过HE染色,透射电镜分析NSC-CM对轴突和髓鞘再生的影响;(4)通过免疫组化染色观察NSC-CM对挤压伤后损伤神经中炎症和巨噬细胞浸润的影响;(5)体外提取并培养大鼠腹腔巨噬细胞,用LPS诱导巨噬细胞建立炎症模型;(6)通过RT-qPCR、Western blot、ELISA分析NSC-CM对巨噬细胞促炎相关蛋白表达的影响并探究其机制。研究结果(1)NSC-CM处理相比于PBS组明显改善挤压伤后大鼠坐骨神经功能指数和损伤侧脚趾伸展情况,并改善腓肠肌萎缩状况(P<0.05)。(2)NSC-CM处理相比于PBS组促进坐骨神经挤压伤后轴突再生和髓鞘再生(P<0.05)。(3)NSC-CM处理相比于PBS组减轻了损伤后第14 d炎症因子(IL-6,IL-1β,TNF-α)的表达和炎性巨噬细胞(CD68)的浸润(P<0.05),但在损伤早期即第3 d,与PBS相比,NSC-CM处理组炎症因子表达和巨噬细胞数量无统计学差异(P>0.05)。(4)与对照组相比,NSC-CM显著抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎相关蛋白(IL-6,IL-1β,TNF-α,iNOS)的表达(P<0.05)。(5)与对照组相比,NSC-CM明显激活巨噬细胞Sirt-1蛋白表达(P<0.05),并调节HIF-1α和NF-κB信号分子(P<0.05)。经Sirt-1特异性抑制剂EX 527处理后,能部分减弱NSC-CM对巨噬细胞的抑炎作用。研究结论(1)NSC-CM改善坐骨神经挤压伤后大鼠的功能恢复,促进轴突再生和髓鞘再生。(2)NSC-CM减轻损伤后期炎症因子表达和巨噬细胞浸润。(3)NSC-CM体外显著抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎相关蛋白的表达。(4)NSC-CM通过激活Sirt-1信号通路抑制巨噬细胞炎症反应。