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目的:前期研究显示,针灸能有效调节UC动物模型紊乱的Th17/Treg免疫平衡轴,并且对Th17和Treg的上游调控蛋白RORγt和FOXP3也有较好的良性调节作用。最近研究显示,RORγt和FOXP3又受到上游STAT3和HIF-1α的调控。因此,本课题将在以往研究基础上,进一步以STAT3和HIF-1α为切入点,研究针灸对STAT3和HIF-1α的作用效应,以期进一步明确针灸的作用机制,为临床治疗溃疡性结肠炎的作用机理提供更翔实的科学依据。方法:采用DSS法复制UC模型,将32只雄性KM小鼠,通过随机数字表法随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组各8只。选取关元、足三里分别进行针刺及艾灸治疗,连续五天。通过观察一般情况、疾病活动指数(DAI)、结肠形态,明确针灸对UC的治疗效应。通过免疫组化及western blot法检测结肠组织中STAT 3和HIF-1α蛋白的表达,观察针灸对UC小鼠免疫功能的影响。结果:1.针灸对UC小鼠的治疗效应观察(1)DSS诱导复制溃疡性结肠炎模型后,小鼠一般状况较差,DAI评分明显增高;经过针刺和艾灸治疗后,两组小鼠的一般状况好转,DAI评分下降,与模型组相比具有统计学意义(P<0.05),针刺和艾灸组间DAI无明显差异(P>0.05)。(2)结肠组织HE结果显示,模型组结肠黏膜不连续,充血明显,中、重度水肿,腺体结构破坏,大量炎性细胞浸润;针刺组和艾灸组,腺体破坏较模型组轻,黏膜下层轻度水肿,炎细胞浸润量少,与模型组相比,更接近空白未造模组,而针刺与艾灸组之间无明显差别。2.针灸对UC小鼠STAT 3、HIF-1α蛋白的影响(1)免疫组化结果显示,STAT 3、HIF-1α在空白组无阳性信号(-)或仅见很弱的阳性信号(+-),模型组中STAT 3、HIF-1α的阳性信号明显增高,均表现为强阳性(+++),经过针灸治疗后,与模型组相比STAT 3、HIF-1α蛋白的阳性信号均减少,有统计学差异(P<0.05)。艾灸组与针刺组相比,艾灸组阳性信号少于针刺组,但无统计学差异(P>0.05)。说明针刺和艾灸均可以减少STAT3、HIF-1α蛋白在结肠组织中的表达,且艾灸组略优于针刺组。(2)western blot结果显示,模型组中STAT3、HIF-1α的表达较空白组明显增高(P<0.05),经过针刺和艾灸治疗后,与模型组相比STAT3、HIF-1α蛋白的表达情况显著下降,有统计学差异(P<0.05)。艾灸组与针刺组相比,艾灸组STAT3、HIF-1α表达低于针刺组,但无统计学差异(P>0.05)。说明针刺和艾灸均可以减少STAT3、HIF-1α蛋白在结肠组织中的表达,且艾灸组优于针刺组。结论:针刺和艾灸能有效降低UC小鼠结肠组织STAT3和HIF-1α蛋白的表达,验证了我们前期的研究结果,进一步从Th17/Treg免疫平衡的角度揭示了针灸治疗UC的作用机制。此外,我们的研究显示,艾灸组略优于针刺组,但组间无统计学差异,相关机制有待进一步研究。