子痫前期患者胎盘组织中miRNA-19a、BMPR2的表达及其相关性

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目的研究子痫前期患者胎盘组织中miRNA-19a、BMPR2的表达及其相关性。方法1选取2017.01-2017.06我院产科行剖宫产分娩的产妇69例,其中正常妊娠产妇(正常组)29例,轻度子痫前期产妇(轻度子痫前期组)14例,重度子痫前期产妇(重度子痫前期组)26例。应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测miRNA-19a在29例正常妊娠、14例轻度子痫前期产妇和26例重度子痫前期产妇胎盘组织中的表达差异。2应用免疫组化、Western Blot技术检测BMPR2蛋白在29例正常妊娠、14例轻度子痫前期产妇和26例重度子痫前期产妇胎盘组织中的表达差异。3培养JEG-3细胞,用lipofectamine2000转染FAM-hsa-miRNA-19a使其在JEG-3细胞中过表达,在荧光显微镜下观察FAM荧光、应用PCR检测转染后细胞中miRNA-19a的表达,检测转染效率;用PCR、Western blot技术检测JEG-3细胞转染hsa-miRNA-19a后细胞中BMPR2m RNA、BMPR2蛋白的表达水平;应用MTT、Transwell技术检测JEG-3细胞转染hsa-miRNA-19a后细胞的增殖能力和侵袭能力。4采用SPSS17.0软件处理数据,多个样本采用单因素方差分析,采用pearson分析相关性。结果1 miRNA-19a在轻度子痫前期和重度子痫前期患者胎盘组织中的表达水平高于正常妊娠(F=409.408,P<0.05),且重度子痫前期患者胎盘组织中miRNA-19a表达显著高于轻度子痫前期组患者(P<0.05)。2 BMPR2蛋白在轻度、重度子痫前期胎盘组织中表达水平比在正常妊娠胎盘组织中的表达低(P<0.05),且重度子痫前期胎盘组织表达显著低于轻度子痫前期患者(P<0.05)。miRNA-19a与BMPR2的表达呈现负相关,差异具有统计学意义(r=-0.684,P=0.000)。3 FAMhsa-miRNA-19a转染JEG-3细胞使其过表达后,荧光显微镜下观察细胞中FAM荧光,转染效率达80%;行PCR检测转染后细胞中miRNA-19a的表达水平,结果显示mi R-mimics组显著高于对照组(NC组、Lip组、mi R-NC组)(P<0.05),对照组(NC组、Lip组、mi R-NC组)间差异无统计学意义(P>0.05)。转染miRNA-19a后行PCR、Western Blot检测,显示mi R-mimics组中BMPR2m RNA、BMPR2蛋白的表达水平均显著低于对照组(NC组、Lip组、mi R-NC组)(P<0.05),对照组(NC组、Lip组、mi R-NC组)间BMPR2m RNA、BMPR2蛋白的表达相比较,差异均无统计学意义(P>0.05);MTT、Transwell结果显示转染hsa-miRNA-19a后JEG-3细胞增殖能力及侵袭能力与对照组比较显著下降(P<0.05),对照组(NC组、Lip组、mi R-NC组)间细胞增殖能力及侵袭能力相比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论1 miRNA-19a在子痫前期患者胎盘组织中表达升高,且随着病情加重其表达逐渐升高;2 BMPR2在子痫前期患者胎盘组织中表达降低,且随着病情加重,其表达逐渐降低;3 BMPR2是miRNA-19a的靶基因,miRNA-19a通过负性调节BMPR2的表达参与子痫前期的发生与发展。
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