目的:抵抗素是新近发现的一种脂肪因子,在肥胖和超重儿童中血清浓度有不同程度升高,与心脑血管疾病等密切相关。通过原代培养幼鼠主动脉内皮细胞建立体外模型,以不同浓度抵抗素(resistin)干预,模拟正常和肥胖状态下抵抗素水平,从分子、蛋白、酶的活性、基因的表达及转录、翻译后调节等多个水平研究幼鼠主动脉内皮细胞一氧化氮(NO)系统的调控机制。方法:取幼鼠胸主动脉,用植环贴壁法原代培养大鼠主动脉内皮细胞,消化、传代,观察细胞形态,VIII因子相关抗原免疫细胞化学染色进行细胞鉴定,建立体外细胞模型。取传至3-5代的大鼠主动脉内皮细胞,以不同浓度鼠抵抗素(10-100 ng/ml)干预24小时。MTT法检测内皮细胞活性,化学比色法检测NO及NOS酶活性,蛋白免疫印迹法检测细胞内eNOS(内皮型一氧化氮合酶)蛋白和P-eNOS(磷酸化一氧化氮合酶)蛋白的表达,RT-PCR检测eNOSmRNA表达的变化。结果:幼年大鼠主动脉内皮细胞经不同浓度鼠重组抵抗素处理24小时后:1.光镜下观察细胞形态均未发生明显改变。2.与对照组和10 ng/ml相比,50 ng/ml和100 ng/ml组细胞活性下降。3.各组NO产物及eNOS活性均未发生改变。4.与对照组相比,50 ng/ml和100 ng/ml组细胞eNOS蛋白和mRNA表达减少。5.各组P-eNOS表达未见改变。结论:抵抗素可减低幼年大鼠主动脉内皮细胞的细胞活性,调控NO系统,使eNOS蛋白和基因表达水平降低,其但未见通过调控磷酸化作用影响酶的活性从而降低NO产物的合成。