蛋白质印迹是一项新兴的用于蛋白质分离检测的技术,然而由于蛋白质存在体积庞大、结构复杂、构象易变等特点,导致蛋白质印迹存在选择性不好、质量传输困难等问题。本论文针对目前蛋白质印迹的局限性,在模板法制备多孔二氧化硅薄膜的基础上,以枯草芽孢杆菌为模板和载体,采取牺牲模板策略制备了具备良好选择性和质量传输能力的蛋白质印迹薄膜。主要工作包括以下两个方面:1.使用聚苯乙烯(PS)微球和细菌为模板制备多孔二氧化硅薄膜:(1)以PS微球为模板制备自支撑多孔二氧化硅薄膜,我们将气液界面自组装法和溶胶凝胶技术结合制备了层数可控的有序多孔二氧化硅薄膜,在保证孔有序紧密排列的前提下,多孔层数可方便控制在1-3层,甚至更多;然后,采用自组装法在多孔二氧化硅薄膜中引入碳纳米管以提高二氧化硅薄膜的机械稳定性,碳纳米管的密度可以通过自组装的次数得到控制;(2)以细菌为模板结合水相溶胶凝胶技术制备形貌和厚度可控的二氧化硅薄膜。2.基于模板法制备的多孔二氧化硅薄膜在蛋白质分析中的应用研究:(1)使用细菌为模板制备多孔二氧化硅薄膜用于蛋白质印迹研究。我们以枯草芽孢杆菌为牺牲模板,将蛋白质分子(绿色荧光蛋白(GFP)、细胞色素C(CYC)等)偶联在细菌表面,采取基于水相环境的溶胶凝胶技术,制备了具有选择性的蛋白质印迹薄膜。以GFP为模板蛋白,采用荧光显微镜定性分析了蛋白质印迹薄膜选择性;以CYC为模板蛋白,结合紫外可见分光光度法对蛋白质印迹薄膜的吸附容量、吸附动力学、选择性等进行了定量分析。研究结果表明,我们制备的蛋白质印迹薄膜具有较好的印迹结合容量、较高印迹因子和良好的选择性。(2)使用PS微球模板制备多孔二氧化硅薄膜,在多孔结构中修饰了纳米金,并进行了100 nm氨基化微球的选择性捕获实验,为制备蛋白质选择性滤膜提供了思路。