传统药用植物瑞香狼毒,既是目前急需防治的“草原毒草”,也是资源丰富的天然化合物“宝库”。其活性成分在杀虫、抗肿瘤及抗HIV病毒等方面有着显著的效果。课题组前期试验结果表明:瑞香狼毒石油醚萃取物中流分7、8对TMV的治疗效果最好。经HPLC-ESI-MS鉴定发现二者存在相同的化合物,为狼毒素A、C,其中狼毒素A在流分7中占比77.92%;而且研究发现该提取物对供试植株具有一定的促生作用。因此,为明确狼毒素A、C对寄主抗TMV的主要作用机理,本试验以TMV-GFP为供试毒源,研究了狼毒素A、C标准品对TMV的作用,及其所引起的寄主抗性防卫反应。试验结果如下:1.采用叶盘法测定了不同浓度狼毒素A、C对TMV活性的影响,其中狼毒素A在20μg·m L-1时对TMV的侵染扩散表现出抑制作用,狼毒素C在40μg·m L-1时对病毒的扩散有一定的影响。透射电镜观察结果显示,狼毒素A对体外病毒粒子结构有破坏作用,使其断裂及部分降解。2.狼毒素A在20μg·m L-1时处理本氏烟后,对病毒的侵染扩散有抑制效果。而狼毒素C在20μg·m L-1时处理本氏烟后,在病毒的整个复制增殖过程中有促进作用,加快了病毒在寄主体内的系统侵染。3.狼毒素A通过促进NPR1、PR1、PR2抗性基因的表达,诱导产生病程相关蛋白,提高寄主抗病性;狼毒素C对PR1、PR2基因的表达前期有一定影响。在茉莉酸介导的信号转导途径中,狼毒素A、C对MYC1a基因的表达有一定的促进作用,对COI1基因的表达无显著影响。在乙烯介导的信号转导途径中,各处理组对ERF1基因的表达均有一定的促进作用。4.狼毒素A、C处理本氏烟植株后,对植株体内防御酶的活性有一定的影响,能够诱导植株相关防御酶的提升。此外,狼毒素A处理植株后能使植物细胞内MDA含量显著降低,减轻膜脂过氧化对细胞的影响,狼毒素C处理后其含量急剧增加,加深对植物细胞膜结构的损害。