新生期母婴分离致成年后行为异常的机制研究

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目的建立新生期母婴分离大鼠模型,观察母婴分离致大鼠海马区小窝蛋白-1(Caveolin-1),胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)及脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)的表达水平变化,初步探讨新生期母婴分离导致大鼠成年后行为异常的可能机制。方法新生Wistar大鼠48只,随机分为分离组和对照组,每组24只,每组又分为三个亚组,各8只。分离组于出生后第2-21d每天上午8:00-11:00与母鼠分离3h,然后再送回笼中与母鼠团聚,对照组不做任何处理。在出生后7d,14d,21d断头处死大鼠并取其大脑,取材后作石蜡切片。采用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-peroxidase, SP)法检测各组海马区Caveolin-1、GFAP、BDNF的表达水平。应用Image-Pro Plus (IPP)6.0图像分析系统对免疫组化图像做半定量分析。结果(1)Caveolin-1, GFAP, BDNF蛋白在大鼠海马组织的表达和分布:以出现棕黄色颗粒作为阳性判断标准,Caveolin-1主要在海马神经元和神经胶质细胞表达;GFAP主要表达于海马星形胶质细胞;BDNF主要在海马锥体细胞与齿状回颗粒细胞呈颗粒状表达。(2) Caveolin-1在大鼠海马组织的表达:对照组海马Caveolin-1的表达在出生后7d、14d、21d逐渐增加,各时间点的差异有统计学意义(P<0.01);分离组海马Caveolin-1的表达在出生后7d、14d无明显差异,而在第21d有明显的增加(P<0.05);与对照组(0.15±0.02)相比,出生后7d分离组(0.15±0.01)无显著差异(P>0.05);出生后14d,与对照组(0.19+0.03)相比,分离组Caveolin-1的表达(0.16±0.02)减少(P<0.05);出生后21d,与对照组(0.25±0.02)相比,分离组Caveolin-1的表达(0.21+0.02)显著减少(P<0.01);(3) GFAP在大鼠海马组织中的表达:对照组海马GFAP的表达在出生后7d、14d、21d逐渐增加,各时间点的差异有统计学意义(P<0.05);分离组海马GFAP的表达在出生后7d、14d、21d的增长差异并不明显(P>0.05)。出生后7d,与对照组(0.19±0.02)相比分离组(0.22±0.02)GFAP的表达有了明显增多(P<0.01);出生后14d,与对照组(0.24±0.02)相比,分离组GFAP的表达(0.21±0.03)减少(P<0.05);出生后21d,与对照组(0.27+0.03)相比,分离组GFAP的表达(0.23+0.02)减少(P<0.05);(4) BDNF在大鼠海马组织中的表达:对照组海马BDNF的表达在出生后7d、14d、21d,随时间而增多较明显(P<0.05);分离组海马BDNF的表达在出生后7d、14d、21d,差异并不明显(P>0.05);出生后7d,与对照组(0.15+0.01)相比,分离组(0.18±0.02) BDNF的表达有所增多(P<0.05);出生后14d,与对照组(0.21±0.02)相比,分离组BDNF的表达(0.18+0.02)减少(P<0.05);出生后21d,与对照组(0.25±0.02)相比,分离组BDNF的表达(0.20±0.03)显著减少(P<0.01);结论新生期母婴分离可致大鼠海马Caveolin-1, GFAP, BDNF的表达出现不同程度的下降,这可能与生命早期母婴分离导致成年后的行为异常有关。
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