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本研究针对使用冰鲜鱼对养殖鱼类的健康存在潜在威胁和鱼粉资源短缺这两个制约行业健康发展的问题,以优质的海水肉食性鱼类——珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)为实验对象,以肠道健康为关注点,对冰鲜鱼和配合饲料使用效果进行比较研究,并评估两种植物蛋白源(花生粕和脱酚浓缩棉籽蛋白)替代鱼粉蛋白的使用效果。具体研究内容及结果如下:1.分别投喂配合饲料(FM组)和冰鲜青鳞鱼(CTF组,对照组)饲养石斑鱼10周后发现,两组鱼的生长性能没有显著差异(P>0.05)。对饲料的生物经济分析发现,FM组的鱼的利润显著高于CTF组(P<0.05)。肠道组织切片结果显示FM组的前肠(PI)、中肠(MI)、后肠(DI)的皱襞高度(FH)和中肠的肌层厚度(MT)显著高于CTF组(P<0.05)。此外,FM组鱼的消化酶(胰蛋白酶和胃蛋白酶)活性显著提高,而CTF组的溶菌酶(LYS)活性显著提高(P<0.05)。FM组鱼血清中补体成分4(C4)和免疫球蛋白M(Ig M)的水平显著降低,而FM组鱼中补体成分3(C3)的水平较高(P<0.05)。在鱼后肠中,FM组的Ig M水平明显升高,而CTF组的LYS活性以及C3和C4水平较高(P<0.05)。FM组先天免疫基因(MHC IIβ和TLR22)和炎性细胞因子(IL-1细、IL-6、IL-10、TNFα1和IFNγ)的表达显著下调(P<0.05)。通过二代测序分析后肠的细菌群落。在门的水平上,FM组中酸杆菌门的相对丰度显著较低,而CTF组中拟杆菌门的相对丰度较低(P<0.05)。在科水平上,FM组黄杆菌科的相对丰度显著较低,而CTF组拟杆菌科S24-7和毛螺旋菌科的相对丰度较低(P<0.05)。两组之间变化最大的途径是代谢和遗传信息处理(P<0.05)。所有结果表明,FM组的饲料的经济效益、肠道组织学指标、消化能力、免疫力及肠道菌群均显著优于CTF组。2.分别投喂以花生粕(PNM)分别替代0%(FM)、10%(PNM10)、20%(PNM20)、30%(PNM30)、40%(PNM40)和50%(PNM50)的鱼粉(FM)蛋白的实验饲料饲养石斑鱼10周后发现,用PNM替代FM对珍珠龙胆石斑鱼的生长性能、饲料利用、形态学指标和全鱼体成分没有显著影响(P>0.05)。肠道酸性磷酸酶的活性随着替代水平的升高而先升高后降低(P>0.05),而LYS的活性和Ig M的含量显著升高(P<0.05)。后肠的MHC IIβ和TLR 22的基因表达量随着替代比例的增加而显著上调(P<0.05),但替代比例高达50%时,与FM组无显著性差异(P>0.05)。PNM40和PNM50组的鱼后肠的epinecidin和hepcidin的基因表达量显著低于FM组(P<0.05)。对后肠的肠道群落进行分析显示,在门的水平上,拟杆菌门的相对丰度随着替代比例的增加而先增加后降低,在PNM20组达到最大值;在科水平上,拟杆菌科S24-7的相对丰度具有相同的趋势;弧菌科的相对丰度随着替代水平的增加而增加,在PNM50组达到最大值(P>0.05)。对后肠菌群的功能预测表明,随着替代水平的升高,折叠、分类和降解通路显著减少(P<0.05);PNM50组的糖合成和代谢以及免疫系统通路均显著低于FM组,而萜类和聚酮化合物的代谢却呈现相反的趋势(P<0.05)。总之,用PNM替代50%的FM对珍珠龙胆是石斑鱼的生长性能没有显著的负面影响,但显著改变了其肠道的免疫力和肠道菌群。3.分别投喂用脱酚浓缩棉籽蛋白(CPC)替代0%(FM)、20%(CPC20)、40%(CPC40)和60%(CPC60)的鱼粉(FM)蛋白的实验饲料饲养石斑鱼10周后发现,用CPC替代FM对珍珠龙胆石斑鱼的生长性能、形态学指标和全鱼体组成均没有显著影响(P>0.05)。但是,含CPC的组中鱼的饲料系数高于FM组,其中CPC60组中的鱼的饲料系数显著升高(P<0.05)。与FM组相比,CPC替代组中LYS活性和Ig M水平显著增加(P<0.05),超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著降低(P<0.05);CPC替代组先天免疫基因MHC IIβ、TLR22、TNFα1、IL-6、IFNγ和IL-10的基因表达量显著增加(P<0.05);TGFβ1的表达量没有显著变化。肠道切片结果显示CPC60组的PI的FH和MT,MI的MT和DI的FH显著低于FM组,而CPC20组中PI的皱襞宽度显著高于FM组(P<0.05)。对肠道菌群进行分析,结果表明各组之间的α多样性没有显著性差异(P>0.05)。在科水平上,CPC20组的伯克氏菌科的相对丰度比FM组高,而拟杆菌科S24-7和毛螺旋菌科的相对丰度在FM组则高得多(P<0.05)。微生物群的功能预测表明,含CPC的组的氨基酸代谢、异生物素的生物降解和代谢的通路比FM组丰富得多(P<0.05)。相反,与遗传信息处理(翻译、复制和修复)相关的通路在FM组中的丰度更高(P<0.05)。综上所述,尽管CPC替代FM的水平高达60%对珍珠龙胆石斑鱼的生长性能没有显著影响,但对肠道的免疫反应却产生了不利影响;用CPC替代FM对微生物组成有重要影响,但对微生物的多样性没有显著性影响。本研究表明,饲喂冰鲜鱼和配合饲料对珍珠龙胆石斑鱼生长性能无显著性差异;与投喂冰鲜鱼相比,投喂配合饲料显著改善了鱼的消化能力、免疫功能和肠道菌群结构,且具有更好的经济效益;花生粕和脱酚浓缩棉籽蛋白替代鱼粉蛋白的适宜水平分别为30%和20%;两种植物蛋白源替代鱼粉蛋白上调了后肠先天免疫和炎症因子相关基因表达;随着替代比例的提高,有益菌(拟杆菌科S24-7和毛螺旋菌科)相对丰度减少,而病原菌(弧菌科或伯克氏菌科)相对丰度增加。