稻瘟病是水稻最严重的真菌性病害之一,每年造成严重的产量损失。由于稻瘟病病原菌生理小种的不断变异使得栽培稻原有的抗稻瘟病基因逐渐丧失抗性,因此将发掘出新的抗稻瘟病基因转入水稻中来提高稻瘟病的抗性是防治稻瘟病可行的方法之一。本实验室前期研究工作从苦参(Sophoraflavescens Ait.)块根中分离得到一种凝集素蛋白(SFL),其对水稻稻瘟病菌(Piricularia oryzae Cav.)的生长有明显抑制作用,并且已分离克隆了SFL基因。本研究将含安全标记基因的pCApmi1300-SFL载体转入到水稻中,在此基础上建立了甘露糖安全筛选体系,进一步选育出含安全标记基因的抗稻瘟病的新株系,为水稻抗稻瘟病育种提供有利条件。主要结果如下:　　 1.成功将植物表达载体pCApmil300-SFL通过电激法导入农杆菌LBA4404菌株中,成功构建二价载体pCApmi1300-SFL-Bchi。　　 2.本实验使用了MS和NB培养基,以云资粳41和楚粳27为受体,将MS和NB培养基结合起来使用可以提高愈伤组织的诱导率和再生率。他们愈伤的诱导率分别为96.5％和89％。　　 3.SFL基因通过农杆菌介导法转入到云资粳41和楚粳27。不同组合的甘露糖和蔗糖对水稻抗性愈伤组织的影响的结果表明,在水稻的转化实验中,以甘露糖为筛选剂时,15g/L甘露糖和15g/L的蔗糖的配比为宜。对获得的水稻抗性植株叶片随机挑取进行CPR检测叶片的PMI活性,初步证明转化再生植株中部分为阳性植株。　　 4.通过PCR检测确认了阳性转化株,云资粳41的再生苗中检测到含目的基因SFL的有36株,转化率约为17.6％,楚粳27的再生苗中检测到含目的基因SFL的15株,转化率约为14.9％。用RT-PCR验证了SFL基因在植物叶片中的表达,上述结果表明,SFL基因已经成功转入到水稻中,并很好的表达。　　 5.鉴定了T1代转基因水稻植株对稻瘟病的抗性。稻瘟菌孢子悬浮液喷雾接种试验结果表明和非转基因对照相比,转基因水稻植株对稻瘟病的抗性提高了。　　 本研究结果表明,通过把苦参凝集素基因导入水稻基因组中,可以提高水稻植株的抗稻瘟病能力。研究获得的转基因植株为进一步深入分析转化植株的抗菌谱,用于选育抗稻瘟病水稻新品种,奠定了坚定的基础。