【摘 要】
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由于鸡独特的生殖生理特点,鸡的输卵管生物反应器的研究已成为转基因研究的热点之一.该研究在成功克隆了鸡的卵清蛋白基因5端调控序列和猪的β干扰素基因的基础上,构建重组逆
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由于鸡独特的生殖生理特点,鸡的输卵管生物反应器的研究已成为转基因研究的热点之一.该研究在成功克隆了鸡的卵清蛋白基因5端调控序列和猪的β干扰素基因的基础上,构建重组逆转录病毒表达载体pLN-OV-INF,利用瞬时感染法,将重组载体pLN-OV-INF及VSV-G膜蛋白的表达载体pVSV共转染GP<,2>293包装细胞以生产复制缺隐性的逆转录病毒,显微注射病毒液于未孵蛋胚下腔中感染鸡胚,采用代用收壳法进行体外培养至出壳,制备出含有外源基因序列的转基因鸡,为制作表达猪的β干扰素基因的鸡输卵管生物反应器奠定基础.该实验一只活鸡的羽毛囊PCR检测呈阳性,说明获得该鸡部分细胞已整合有外源基因,但性腺细胞是否整合,仍需进一步实验进行验证.实验结果说明利用复制缺隐性逆转录病毒载体法制作鸡的输卵管生物反应器是可行的,需要改进的是进一步提高复制缺陷性的逆转录病毒的滴度和扩大难胚的孵化数量以培养出性腺细胞整合有外源基因的转基因鸡.
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