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第一部分 TCT联合高危型HPV检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值研究目的:探讨宫颈液基薄层细胞学检测(TCT)联合高危型人乳头瘤病毒(HPV)-DNA检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的临床应用价值,以期能够为宫颈病变(癌前病变及癌)的临床诊断、筛选以及治疗提供参考意见。方法:选取2018年1月至2019年5月川北医学院附属医院妇科及体检中心就诊的病人,筛选出经阴道镜下活检确诊为宫颈炎137例、CIN Ⅰ型95例、CINⅡ～Ⅲ型101例、宫颈癌45例共378例患者作为研究对象,同时进行TCT和高危型HPV-DNA检测,记录患者年龄、TCT和高危型HPV-DNA检测结果,进行统计学分析。结果:1.378研究对象,高危型HPV检测为阳性的概率为:64.02%,高危型HPV感染的主要人群年龄为:40-60岁,中位年龄为:48岁,覆盖率为:64.88%。2.在高危型HPV检查阴性者中,病理活检的宫颈病变检出率为:38.24%,在高危型HPV检查阳性者中,病理活检的宫颈病变检出率为:78.10%,HPV检查阳性者的宫颈病变检出率明显高于HPV检查阴性者(P<0.01);与感染HPV18型及其他13种类型的患者相比,HPV16型的病变检出率最高为91.46%,且差异有统计学意义(P<0.01);本研究将病理结果分为三组,即慢性炎症组、CINⅠ组、CINⅡ+组,三组HPV感染阳性率分别为38.7%、52.6%、95.2%。三组病检结果中HPV感染阳性率存在显著差异(P<0.01)。3.本研究显示TCT结果为ASC-H(非典型性鳞状细胞,不除外高级别鳞状上皮内病变)比ASC-US(没有明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞)更能检测出CIN Ⅱ及以上病变(即高级别上皮内病变、宫颈癌),差异有统计学意义(P<0.01)。TCT结果为HSIL组的诊断符合率高于LSIL组,差异有统计学差异(P<0.01)。4.将阴道镜下病理活检结果作为本研究的金标准,与TCT、HPV单独检测相比,HPV+TCT联合检测的诊断符合率、灵敏度、特异度均更高,分别为89.42%(338/378)、98.34%(237/241),73.72%(101/137),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高危型HPV感染与女性宫颈癌、癌前病变的发生以及病变的严重程度呈正相关,HPV16型为癌前病变及宫颈癌最为常见的感染亚型。宫颈液基细拖(ICT)检测与阴道镜下活检结果在反应宫颈病变的程度上有很好的一敌性,存在正相关性。TCT与高危型HPV联合检测能提高检测的符合率、灵敏度和特异度,这对早期筛查宫颈病变及减少漏诊提供更好的临床指导。第二部分 LncRNAATB对宫颈癌HeLa细胞株的增殖、侵袭、凋亡的影响研究目的:研究长链非编码 RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)ATB的表达对宫颈Hela细胞株增殖、侵袭和迁移、凋亡的影响。方法:应用小干扰RNA技术下调宫颈癌Hela细胞ATB RNA表达,即将ATB小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列(negative siRNA)分别转染宫颈癌Hela细胞,利用荧光实时定量PCR(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测其下调效率;CCK8 及克隆形成实验检测下调ATB表达后对Hela细胞增殖的影响;流式细胞学检测下调ATB表达后对Hela细胞凋亡的影响;Transwell实验检测下调ATB表达后对Hela细胞侵袭迁移的影响。结果:向宫颈癌Hela细胞中转染ATB-siRNA 48h后,经qRT-PCR检测Hela细胞中ATB表达明显减少(P<0.01);CCK8及克隆形成实验显示,下调ATB表达能显著抑制Hela细胞的增殖(P<0.01);流式细胞学实验显示,下调ATB表达能促进Hela细胞凋亡;Transwell实验显示,下调ATB表达能显著抑制Hela细胞迁移侵袭能力(P<0.01)。结论:ATB-siRNA转染宫颈癌Hela细胞后能够明显下调Hela细胞中ATB的表达,进而对宫颈癌Hela细胞的增殖及其侵袭迁移能力起抑制作用,对凋亡起促进作用。提示长链非编码RNA ATB在宫颈癌中是一种促癌基因,ATB的表达异常增高可能是宫颈癌发生发展的重要分子机制。