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本研究分为二部分:
第一部分、普萘洛尔对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α和IL-10及吞噬功能影响的初步研究
目的:观察不同浓度普萘洛尔对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞受脂多糖刺激后分泌α-肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-10(IL-10)以及细胞吞噬功能的影响。
方法:将培养的BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞细胞分为4组:空白组,用生理盐水处理作为空白对照组;脂多糖组,仅以10μg/ml脂多糖刺激;普萘洛尔组,分别以不同浓度的普萘洛尔(0.1、1、10μmol/L)处理;普萘洛尔+脂多糖组,分别以不同浓度的普萘洛尔(0.1、1、10μmol/L)预处理,2小时后再以10μg/ml脂多糖刺激。采用酶联免疫吸附法,于加入不同浓度药物培养6h后,测定各培养瓶上清液中TNF-α的浓度,24h后测定IL-10的浓度,并用中性红吞噬试验检测巨噬细胞吞噬功能。
结果:在用脂多糖刺激的情况下,普萘洛尔呈浓度依赖性的增加巨噬细胞TNF-α的分泌,减少IL-10分泌,并使巨噬细胞吞噬功能下降。
结论:普萘洛尔对用脂多糖刺激的BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞炎症介质的释放和细胞吞噬能力具有调节作用。
第二部分、异丙肾上腺素对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响以及普萘洛尔干预作用的初步研究
目的:体外培养BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞,观察有或无普萘洛尔干预时,异丙肾上腺素对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞功能调节作用的变化。
方法:异丙肾上腺素(浓度分别为10μmol/L、100μmol/L、300μmol/L)加入BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞培养液,孵育2小时后,用脂多糖(LPS,10μg/ml)刺激,再孵育6小时,以酶联免疫法测定上清中TNF-α,24小时后,测定上清中IL-10的含量,并观察腹腔巨噬细胞对中性红吞噬能力的变化。另以不同浓度的普萘洛尔(0.1、1、10μmol/L)及300μmol/L异丙肾上腺素共同对BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞进行处理,孵育2小时后,用脂多糖(LPS,10μg/ml)刺激,同样测定TNF-α、IL-10的含量,观察腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬能力,了解普萘洛尔对异丙肾上腺素影响的干预作用。
结果:异丙肾上腺素能使由脂多糖刺激引起BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α减少,IL-10增加,增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力。但在有普萘洛尔干预的情况下,异丙肾上腺素则对由脂多糖刺激引起BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α减少和IL-10增加的程度,以及增强巨噬细胞对中性红的吞噬能力均显著降低。
结论:普萘洛尔对异丙肾上腺素引起的巨噬细胞功能影响有明显的反向干预作用。