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本课题通过建立AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）增殖的模型,应用不同浓度的四妙勇安汤干预,观察其对AngⅡ诱导的CFs增殖及TGF-β1/Smad3信号转导通路的影响,探讨四妙勇安汤对CFs增殖的影响及调控机制。分离新生大鼠CFs并进行原代培养及鉴定,应用AngⅡ(10-6mol·L-1)建立CFs增殖模型,应用不同浓度四妙勇安汤醇沉药液进行CFs增殖的干预,将传代培养的CFs按实验需求分为A、B、C、D、E五组。即A组:不加入AngⅡ及四妙勇安汤的醇沉药液处理;B组:仅加入AngⅡ处理,但不加四妙勇安汤的醇沉药液;C组:加入AngⅡ处理,并加入含30%四妙勇安汤的醇沉药液进行干预;D组:加入AngⅡ处理,且加入含20%四妙勇安汤的醇沉药液干预;E组:加入AngⅡ处理,和含10%四妙勇安汤的醇沉药液干预。采用MTT比色法检测各组CFs增殖情况,ELISA测各组细胞中TGF-β1表达水平,Western blot法检测Smad3在各组中的活化水平,从而观察四妙勇安汤对AngⅡ诱导的新生大鼠CFs增殖及TGF-β1/Smad3信号转导通路的影响。MTT比色法检测各组CFs存活力:A组OD值为（0.341±0.012）,B组OD值为（0.531±0.016）,C组OD值为（0.465±0.045）,D组OD值为（0.488±0.020）,E组OD值为（0.492±0.017）。B与A组比较,OD值明显升高,说明B组CFs活细胞的数量明显增加,即AngⅡ诱导心肌成纤维细胞的增殖造模成功。C组、D组、E组与B组比较,OD值均明显降低,说明含四妙勇安汤各组能降低AngⅡ诱导增殖模型各孔的OD值,即四妙勇安汤各组能降低AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖,经单因素方差分析,B组与A组比较,差异具有显著性（P<0.05）,有统计学意义;C组、D组、E组与B组比较,差异具有显著性（P<0.05）,亦有统计学意义;C组与E组比较,OD值明显降低,说明C组较E组CFs数量相差明显,经单因素方差分析,两组比较具有显著性差异（P<0.05）,有统计学意义。ELISA法测各组CFs中TGF-β1表达水平:A组TGF-β1含量为（87.68±3.93）pg/ml,B组TGF-β1含量（122.99±4.86）pg/ml,C组TGF-β1含量（101.72±4.74）pg/ml,D组TGF-β1含量为（108.73±8.28）pg/ml,E组TGF-β1含量（114.33±7.86）pg/ml。B组TGF-β1含量较A组升高,而在E、C、D各组中TGF-β1含量均较B组降低,经单因素方差分析,A组与B组相比较,有统计学意义（P<0.05）;C组、D组、E组与B组相比较差异均具有显著性,有统计学意义（P<0.05）;C组较E组和D组TGF-β1含量降低,经单因素方差分析,具有显著性差异（P<0.05）,有统计学意义,E组和D组相比较,无显著性差异,无统计学意义（P>0.05）。Western blot检测Smad3在各组CFs中表达水平:A组Smad3/GAPDH比值为（0.301±0.021）,B组Smad3/GAPDH比值为（0.804±0.030）,C组Smad3/GAPDH比值为（0.522±0.014）,D组Smad3/GAPDH比值为（0.534±0.013）,E组Smad3/GAPDH比值为（0.547±0.064）。B组Smad3/GAPDH比值较A组升高,说明B组Smad3表达水平高于A组,即造模成功,C组、D组、E组较B组Smad3/GAPDH比值均降低,说明四妙勇安汤各组能降低Smad3表达,经单因素方差分析,B组与A组相比较,差异具有显著性,有统计学意义（P<0.05）;C组、D组、E组与B组相比较,差异具有显著性,有统计学意义（P<0.05）;C组、D组、E组相比较,无统计学意义（P>0.05）。综上所述,AngⅡ(10-6mol·L-1)可以诱导CFs增殖。在AngⅡ诱导的CFs增殖模型中加入四妙勇安汤药物干预处理后可抑制CFs增殖。本实验中四妙勇安汤抑制CFs增殖情况随设定浓度梯度升高而增强,即30%浓度抑制CFs增殖作用最强,但是否为最佳药效浓度还有待进一步研究。此外证实四妙勇安汤可降低TGF-β1及Smad3的表达,其机制可能通过调控TGF-β1/Smad3信号通路抑制CFs增殖。