不同方法处理的牛颈静脉带瓣管道免疫学研究

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背景:牛颈静脉带瓣管道(BJVC)是近年研究并应用于临床的带瓣管道,作为带瓣管道有着巨大的潜在价值。作为异种生物材料,牛颈静脉必须经过充分交联鞣制以去除其免疫原性。戊二醛作为一种经典的交联鞣制剂,已用于临床多年,因具有灭菌、去除组织免疫原性作用可靠等特点而得到普遍认同。大多数生物材料的交联鞣制均以戊二醛为首选,但经戊二醛交联鞣制的生物材料存在易钙化易衰败等缺陷。因此须研究发展其他交联技术。多聚环氧化合物及光氧化法处理的生物材料因具有良好的生物相容性,无细胞毒性等优点被认为是具有良好应用前景的两种新型交联技术。研究表明含有胶原蛋白的生物材料免疫原性与其处理方法有关,但用多聚环氧化合物(PC)、戊二醛(GA)、光氧化(DMP)交联鞣制BJVC后是否还存在免疫原性及其大小有无差别,尚未见报道。 目的:研究牛颈静脉带瓣管道经不同方法交联后免疫原性变化方法:牛颈静脉随机分为4组:新鲜牛颈静脉为对照组,PC交联组、GA交联组、DMP交联组。牛颈静脉分别匀浆提取抗原,再与完全弗氏佐剂混合制成复合乳剂抗原后免疫新西兰大白兔,双向免疫扩散法测定兔血清抗体滴度。取新鲜牛颈静脉免疫抗血清,采用免疫印迹法(Westernblot)体外检测不同方法交联后的牛颈静脉带瓣管道免疫原性。 结论:经PC、GA、DMP适当交联处理的牛颈静脉免疫原性均显著性降低,PC和DMP两种新型交联技术能与GA交联一样有效地灭活免疫原性,具有良好的应用前景。 第二部分不同交联方法处理的牛颈静脉移植后免疫学比较目的:经PC、GA、DMP适当交联处理的牛颈静脉免疫原性均显著性降低,但临床观察及动物实验结果表明经典的戊二醛交联没有终止同种移植和异种移植后的免疫应答。本实验探讨不同交联方法处理的带瓣牛颈静脉(BJVC)移植后免疫学变化,为制备BJVC和临床应用提供理论依据。 方法:以PC、DMP化学改性的牛颈静脉带瓣管道为研究对象,建立犬重建右心室—肺动脉连接动物模型;观察9-12个月,通过免疫学及组织学方法,研究其免疫反应。 结论:经PC、GA交联处理的BJVC带瓣管道仍具有一定的免疫原性,移植后仍存在细胞免疫和体液免疫,用DMP交联处理的BJVC带瓣管道具有不引起明显的免疫反应的特点,是一种较好的交联处理方法。 第三部分牛颈静脉带瓣管道临床应用研究目的:目前还没有一种重建右室流出道的理想材料,同种带瓣管道来源困难,有时尺寸大小不合适,还存在退化衰败的问题,本研究旨在评估应用新的替代品—戊二醛交联的牛颈静脉带瓣管道或血管片重建右室流出道治疗复杂先天性心脏病的近期临床效果及免疫反应大小。 方法:2003年10月~2005年1月共应用牛颈静脉带瓣管道(BJVC)治疗复杂先天性心脏病5例。应用牛颈静脉带瓣血管片(BJVCP)重建重症TOF右心室流出道13例(A组),并与同期自体心包跨瓣环加宽13例(B组)进行比较。同时通过免疫学方法,研究其免疫排斥反应。 结论:1、牛颈静脉带瓣管道用于重建右室—肺动脉连接,近期血流动力性能良好,远期血流动力学性能尚待进一步观察研究。 2、牛颈静脉带瓣血管片用于重症TOF右室流出道的重建可获良好的近期治疗效果,但远期效果仍有待进一步观察。 3、体外循环术后机体免疫功能受到明显抑制,是术后易发感染的主要原因,应强调围术期采用综合性预防感染措施的重要性。 4、戊二醛交联的牛颈静脉带瓣血管片植入人体内后,可监测到特异性抗体,但机体未出现明显排斥反应,酶联免疫吸附实验可作为对牛颈静脉带瓣管道移植病例进行临床免疫学随访的重要手段。
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