河鲀毒素（Tetrodotoxin,TTX）是一种毒性极强的非蛋白类神经毒素,其在医药上用途广泛,可作为镇痛药物和麻醉剂,在水产品检测领域也需要TTX标准品。由于TTX在净化和制备上存在难点,高纯度的TTX标准品供不应求。本文对采自广东湛江的织纹螺样品进行了TTX含量分析,并通过阳离子交换树脂、葡聚糖凝胶净化粗提液,后将样液浓缩,用制备型高效液相（HPLC）进行纯化制备。本论文旨在从TTX提取、纯化和制备纯品方面切入,以织纹螺为原料,创新研制TTX产品,旨在寻找一种高效、步骤简便、成本低的生产方法。研究结果如下:1.对来源广东湛江,分别采自4、7、9、10月份的织纹螺样品进行TTX分析,通过免疫亲和柱前处理,用液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）进行分析。所有织纹螺样品均呈阳性,平均浓度在1.8³.1 mg/kg之间,浓度最低的样品来自7月份,浓度最高的样品来自10月份,最高浓度与最低浓度差异显著,织纹螺体内的TTX浓度随月份发生变化,与时间、环境存在一定联系。2.对织纹螺中TTX提取方法进行优化,并对比水浴结合超声辅助提取与传统水浴法的提取率,前者比后者的得率提高了21.8%,考察提取过程中的溶剂种类、水浴温度、液料比等因素,优化后确定最佳提取条件:采用水浴结合超声辅助提取,以1%乙酸甲醇为提取溶剂,60℃水浴温度,液料比为5:1,重复提取1次。3.对几种常见的用于净化TTX的固相萃取（SPE）柱进行实验分析,比较分析MCX、MAX、C₁₈、WCX柱,发现WCX柱的效果较好。优化WCX柱的使用条件,确定上样pH6.4,用5 mL 0.01%氨水和5 mL甲醇淋洗,用5 mL 2%乙酸甲醇-水（8:2,V/V）进行洗脱。4.对3种常见阳离子树脂D113、D152、724进行实验分析,通过吸附率和解吸附率的比较,确定采用D152阳离子树脂作为净化材料。对使用条件进行优化,确定上样pH5.0⁵.5,2%乙酸-甲醇（40:60）作为洗脱剂,洗脱剂量为10 BV（bed volume,柱床容积）。将经过D152树脂净化处理的样液,再次用G-10葡聚糖凝胶净化,凝胶的净化条件为:调节上样液pH6.5⁷.5,上样完毕用纯水淋洗,后用1%乙酸溶液洗脱,洗脱剂量为6 BV。将得到的净化液浓缩至10 mL,用氨水调至pH8.5⁹.0,经过真空冷冻干燥处理,析出15.58 mg白色晶体,用制备型高效液相（HPLC）进行纯品的制备。5.将得到的白色晶体,用10 mL 0.1%甲酸-乙腈（1∶1,V/V）溶液溶解。配制TTX标准溶液获取标准色谱图,根据建立好的标准条件确定毒峰的出峰时间为3.752 min,确定采集时间为3.40⁴.00 min。经过HPLC制备,共得到纯化液54 mL。将纯化液用旋转蒸发仪进行浓缩,浓缩至10 mL。用氨水调至pH8.5⁹.0,经过真空冷冻干燥处理,得到8.58 mg纯品。6.称取纯品1.00 mg,用10 mL 0.1%甲酸-乙腈（1∶1,V/V）溶液溶解,用LC-MS/MS进行纯度分析。分析得到其浓度为32.65μg/mL,则产品的纯度为32.65%。纯品为白色晶体,无臭,性质比较稳定。