本论文优化建立了恩诺沙星胶体金免疫层析分析方法,并有效用于动物源性食品、环境样品及动物代谢物中恩诺沙星的快速检测。本研究利用混合酸酐法合成恩诺沙星包被原,将恩诺沙星抗血清经protein A-sepharose4B进行纯化,得到抗恩诺沙星多克隆抗体。采用柠檬酸三钠还原法制备粒径为17nm胶体金,通过一系列优化,最终确定胶体金连接金标抗体最适pH为9,最佳标记1mg/mL恩诺沙星多克隆抗体用量为20μL。根据优化用量标记恩诺沙星多克隆抗体,制得胶体金标记抗体。以硝酸纤维素膜为固相载体,ENR-OVA包被原)和羊抗兔二抗分别作为检测线和控制线包被在硝酸纤维素膜上,金标记抗体喷涂在玻璃纤维垫上,制成快速检测恩诺沙星免疫层析试纸条。建立了胶体金免疫层析分析方法,检出限为5μg/L,在浓度为1000μg/L时,15种喹诺酮类药物及8种常用兽药对恩诺沙星免疫胶体金快速检测均无明显干扰,表明恩诺沙星胶体金免疫层析分析方法具有较高特异性。选取牛奶、猪肉、猪肝等9种动物源性产品、池塘水及猪尿作为检测样品,分别添加5,20,100μL的恩诺沙星标准品,经过简单的处理即可上样检测,牛奶、池塘水及猪尿样品检测限在5-25μg/L之间,其余动物源性产品检测限为50μg/kg,均低于最高残留限量。所建立的恩诺沙星免疫层析分析方法与酶联免疫分析方法的一致性较好,验证了方法的准确性。论文所开发的胶体金试纸条无需检测仪器,操作简单,快速,准确。实验结果稳定性高,可作为动物性食品中恩诺沙星残留现场大量筛选,及监测动物生长环境中恩诺杀星滥用的有效手段。