论文部分内容阅读
绵羊是多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)的易感动物之一。本论文对2018~2019年我国新疆的哈密地区、昌吉州、阿勒泰地区、和田地区和喀什地区的9个规模化养殖场，采集疑似病料用于分离多杀性巴氏杆菌，进行病原的初步鉴定；再采用生化反应鉴定、Pm种特异性和五种血清型的PCR对分离株进行鉴定；通过对其中一株分离菌的生长曲线测定、耐药性分析、不同注射途径攻毒小鼠、动物回归试验等方法探究其生物学特性；将分离株制备成灭活菌苗免疫BALB/c小鼠，了解其对相同与不同血清型Pm交叉免疫保护的效果。
本论文调查结果显示，新疆部分地区的多杀性巴氏杆菌平均阳性检出率为34.8%(87/268)；从病羊的肺脏组织分离到的细菌在BHI琼脂培养基上长出光滑湿润微凸的灰色小菌落，革兰氏阴性(红色)的小短杆菌，偶有两极浓染；分离菌能发酵葡萄糖、果糖和甘露醇，过氧化氢酶和吲哚等反应为阳性；扩增出16SrRNA基因，核苷酸序列与多杀性巴氏杆菌的同源性大于99.7%；Pm种特异性基因和血清型鉴定结果显示，扩增出Pm种(460 bp)和荚膜A型(1 045 bp)的片段，符合多杀性巴氏杆菌、荚膜血清A型的大小；一共分离到9株A型多杀性巴氏杆菌；分离株PmA-XJ1的药敏试验显示对氟苯尼考、头孢拉定、庆大霉素等药物敏感，活菌数为1.2×108cfu/mL；小鼠、兔的致病性试验和本动物回归试验显示，该菌具有较强的致病性；口服和滴鼻途径攻毒对小鼠无效，皮下注射和腹腔注射均能致其死亡；以小鼠为模型免疫不同组合的菌苗，表明氢氧化铝佐剂灭活菌苗对PmA-XJ1相同血清型的保护率可达到100%，但该菌苗对D型、F型和未知血清型的多杀性巴氏杆菌株仅能为小鼠提供20%、20%和0的交叉免疫保护率。
本研究新疆部分地区规模化羊场存在A型多杀性巴氏杆菌感染，研究共分离到9株绵羊A型多杀性巴氏杆菌。分离株PmA-XJ1的毒力强，对多种实验动物具有较强致病性。将PmA-XJ1制成A型多杀性巴氏杆菌氢氧化铝佐剂灭活菌苗效果较好，但其交叉保护力较差。本研究为后期防控新疆地区的绵羊多杀性巴氏杆菌病以及研发多杀性巴氏杆菌病疫苗提供理论基础。
本论文调查结果显示，新疆部分地区的多杀性巴氏杆菌平均阳性检出率为34.8%(87/268)；从病羊的肺脏组织分离到的细菌在BHI琼脂培养基上长出光滑湿润微凸的灰色小菌落，革兰氏阴性(红色)的小短杆菌，偶有两极浓染；分离菌能发酵葡萄糖、果糖和甘露醇，过氧化氢酶和吲哚等反应为阳性；扩增出16SrRNA基因，核苷酸序列与多杀性巴氏杆菌的同源性大于99.7%；Pm种特异性基因和血清型鉴定结果显示，扩增出Pm种(460 bp)和荚膜A型(1 045 bp)的片段，符合多杀性巴氏杆菌、荚膜血清A型的大小；一共分离到9株A型多杀性巴氏杆菌；分离株PmA-XJ1的药敏试验显示对氟苯尼考、头孢拉定、庆大霉素等药物敏感，活菌数为1.2×108cfu/mL；小鼠、兔的致病性试验和本动物回归试验显示，该菌具有较强的致病性；口服和滴鼻途径攻毒对小鼠无效，皮下注射和腹腔注射均能致其死亡；以小鼠为模型免疫不同组合的菌苗，表明氢氧化铝佐剂灭活菌苗对PmA-XJ1相同血清型的保护率可达到100%，但该菌苗对D型、F型和未知血清型的多杀性巴氏杆菌株仅能为小鼠提供20%、20%和0的交叉免疫保护率。
本研究新疆部分地区规模化羊场存在A型多杀性巴氏杆菌感染，研究共分离到9株绵羊A型多杀性巴氏杆菌。分离株PmA-XJ1的毒力强，对多种实验动物具有较强致病性。将PmA-XJ1制成A型多杀性巴氏杆菌氢氧化铝佐剂灭活菌苗效果较好，但其交叉保护力较差。本研究为后期防控新疆地区的绵羊多杀性巴氏杆菌病以及研发多杀性巴氏杆菌病疫苗提供理论基础。