【摘 要】
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目的探讨靶向调控解偶联蛋白-2 (uncoupling protein 2, UCP-2)基因的表达对肝细胞耐受缺血再灌注损伤能力的影响。方法构建针对UCP-2基因的正义及干扰质粒siRNA,分别转染至
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目的探讨靶向调控解偶联蛋白-2 (uncoupling protein 2, UCP-2)基因的表达对肝细胞耐受缺血再灌注损伤能力的影响。方法构建针对UCP-2基因的正义及干扰质粒siRNA,分别转染至正常肝细胞和脂肪肝细胞中,建立UCP-2 mRNA过度表达及抑制表达的模型。对处于UCP-2 mRNA不同表达状态的细胞进行缺血再灌注处理,于再灌注后不同时间点用Annexin V/PI双标流式细胞仪检测细胞坏死率、凋亡率和存活率;同时收集细胞检测细胞内ATP、ROS、MDA水平,实时荧光定量检测UCP-2 mRNA表达水平。结果缺血再灌注处理后,处于UCP-2 mRNA过表达状态的肝细胞内对应时间点的细胞内ROS、MDA、ATP的水平以及细胞存活率均显著低于其它两组细胞(P<0.05),坏死率显著高于对照组(P<0.05);各组细胞凋亡率无显著差异(P>0.05),而处于UCP-2 mRNA表达抑制状态的脂肪肝细胞再灌注6 h以后两组细胞内ROS、MDA水平及细胞凋亡率差异无显著性(P>0.05);但细胞内ATP水平及细胞存活率在再灌注6 h后的各个时间点上均显著高于脂肪肝细胞对照组(P<0.05)。结论抑制脂肪肝细胞内UCP-2 mRNA的表达能够能够显著的减轻缺血再灌注给脂肪肝细胞带来的损伤,对于细胞功能的维持和恢复具有积极的意义。而对于正常状态下的肝细胞改变其UCP-2 mRNA的表达则无积极意义。
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