多浪羊繁殖性状相关的几个候选基因的多态性研究

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影响绵羊繁殖性状相关的基因很多,其中可能存在一个主效基因,并且不同的绵羊品种,控制多胎性状的主效基因可能是不同的。因此对它们的研究越来越引起人们的关注。本研究以多浪羊(多胎群体)以及繁殖力较低的多浪羊(普通群)和卡拉库尔羊为研究素材,采用聚合酶链式反应-单链构象多态(PCR-SSCP)以及聚合酶链式反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)等方法对繁殖力相关的BMPR-1B、BMPR-IA、BMP4、GnRHR、PGR、INHA、FSHβ和PTGS2等候选基因进行多态性分析;同时,探索这些候选基因与多浪羊(多胎群体)高繁殖力的关系。研究结果表明:(1)采用PCR-RFLP方法对绵羊BMPR-1B基因进行多态性检测,只有多浪羊(多胎群体)存在BMPR-1B基因的FecB突变,BB基因型多浪羊(多胎群体)平均产羔数分别比AA基因型AB基因型多20.91只和0.9只(P<0.05),A和B等位基因频率分别为0.7和0.3。(2)采用1对PCR引物对绵羊BMPR-IA外显子1进行PCR-SSCP分析,在多浪羊(多胎群体)中存在两种基因型,基因型频率分别为0.42和0.58,差异不显著。在该片段中有6处核苷酸发生了突变,并导致了氨基酸的改变,在该分析区域末发现多态性。(3)对于BMP4基因外显子3片段,在多浪羊(多胎群体)中检测到三种基因型,AB>AA>BB,三者平均产羔数之间差异不显著;在多浪羊(普通群)和卡拉库尔羊中检测到AA和AB两种基因型,均差异不显著。(4)对于新疆多浪羊GnRHR基因多态性末见报道的情况下,采用1对PCR引物对绵羊GnRHR外显子1进行PCR-SSCP分析,只在多浪羊(多胎群体)中检测到AA、AB和BB三种基因型,在多浪羊(普通群)和卡拉库尔羊群体中只发现AA基因型。对于多浪羊(多胎群体)来说,BB基因型的平均产羔数分别比AA和AB基因型提高0.65只和0.76只(P<0.05);同时在3处发生了突变,第50bp处的突变导致了氨基酸的改变(赖氨酸→组氨酸);第54bp处的突变导致了氨基酸的改变(谷氨酰胺→组氨酸)。(5)采用2对PCR引物对绵羊INHA基因5'调控区和PGR基因外显子1进行PCR-SSCP分析,在该分析区域末发现多态性。(6)建立了检测绵羊FSHβ基因突变的最佳PCR-SSCP方法,同时对新疆多浪羊FSHβ基因多态性末见报道的情况下,采用1对PCR引物扩增FSHβ基因外显子2片段,在多浪羊(普通群)和卡拉库尔羊群体中检测到AA和AB基因型,两者平均产羔数之间差异不显著;在多浪羊(多胎群体)中,BB基因的平均产羔数分别比AB和BB基因型提高1.11只和1.02只(P<0.05);测序结果表明:在FSHβ外显子2中有6处核苷酸发生了突变,并引起了氨基酸的改变。(7)采用1对PCR引物对绵羊PTGS2基因外显子3进行PCR-SSCP分析,在不同绵羊品种中均不具有多态性。
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