添加SBHA及5-AC刺激下深海来源真菌Aspergillus sp.SCSIOW3化学成分的研究

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自然界中微生物种类众多且数量惊人,然而为人类所知并被利用的微生物数量仅占自然界中微生物总数的5%左右。对于海洋以及其他的极端环境,由于微生物的获取难度大,使得存在于这些地方的微生物资源没有得到充分的开发和利用。本文的内容主要针对包括深海真菌,土壤真菌,植物内生菌展开研究。首先对真菌进行化学表观遗传刺激筛选,即通过在培养基中添加小分子化学表观遗传刺激物来激活真菌代谢能力。所用刺激物包括DNA甲基转移酶抑制剂,如5-杂氮胞苷(5-azacytidine,5-AC),和组蛋白去乙酰化酶抑制剂,即软木肟酸(suberohydroxamic acid,SBHA)。经过发酵培养、乙酸乙酯萃取得到粗提物,再经TLC和HPLC分析发现菌株W3在化学表观遗传刺激后对产生显著变化。首先对W3进行了菌种鉴别,通过ITS序列进行测序后与数据库进行比对,最终确定深海真菌W3为曲霉属(Aspergillus sp.)真菌。对目标菌株Aspergillus sp.SCSIOW3进行扩大发酵。利用各种分离手段,如正相硅胶柱、ODS-C18反向硅胶柱、Sephadex LH-20及HPLC,对粗提物进行分离,最终获得7个化合物,通过各种波谱学手段对化合物进行结构解析,最终确定化合物4、6为新化合物,而化合物1(Diorcinol)、化合物2(Sydonic acid)、化合物3(3,3’-Dihydroxy-5,5’-dimethyldibenzofuran)、化合物5(Cordyol)和化合物7(Cyclo-(L-Trp-L-Phe))为已知化合物。其中化合物1、3、4、5和6均为二苯醚类化合物。对化合物1、2、3、5、6、7进行抗炎活性筛选,结果表明化合物2、3、5、6、7有较强的抑制巨噬细胞(Macrophage RAW 264.7)一氧化氮(NO)产生活性,IC50分别为11.09、7.19、25.73、5.38、22.36μM,而化合物1的IC50为83.33μM。
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