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目的: 观察和比较巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补对体外培养SD大鼠骨髓间充质于细胞(BMSCs)促增殖、抗凋亡及促成骨分化的影响，阐述四味温阳补肾药的作用途径、环节及促进骨生成的机制。 方法: 1.巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补含药血清对BMSCs促增殖的观察:建立SD大鼠BMSCs体外培养体系，倒置显微镜、HE染色进行形态学观察;流式细胞仪(FCM)进行BMSCs细胞周期分析和检测表面标记CD34、CD45、CD90;MTT法检测BMSCs生长曲线;温阳补肾药含药血清配制，确定其最佳药物浓度和最佳血清浓度对BMSCs促增殖的影响。 2.巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补含药血清对BMSCs抗凋亡的观察:建立IL1β诱导BMSCs凋亡体系，倒置显微镜、HE染色进行形态学观察;流式细胞仪检测凋亡率;凋亡细胞DNA电泳;荧光定量PCR检测bax、bcl-2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达;Western Blot检测bax、bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达。 3.巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补含药血清对BMSCs促骨分化的观察:建立诱导BMSCs成骨分化体系，倒置显微镜、HE染色、碱性磷酸酶染色进行形态学观察;测定碱性磷酸酶比活性;骨钙素(BGP)的定量;荧光定量PCR检测核心结合因子a1(Cbfa1) mRNA和sclerostin的表达;Western Blot检测Cbfa1和sclerostin蛋白的表达。 结果: 1.体外培养大鼠BMSCs经倒置显微镜、HE染色的形态学观察均符合BMSCs的形态及生长特点;FCM检测细胞表面标记物结果显示:CD34、CD45表达阴性，CD90表达阳性，证实这些细胞是非造血系细胞。高、中、低剂量的四昧中药含药血清对F3 BMSCs72h的增殖效应显示，以中剂量组20％含药血清对F3 BMSCs72h后促增殖最明显，其组间比较结果为淫羊藿＞骨碎补＞巴戟天＞鹿角胶。 2.IL1β诱导BMSCs凋亡的形态学观察结果、流式细胞仪测定结果、DNA电泳结果、荧光定量PCR检测bax、bcl-2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA的表达;WesternBlot检测bax、bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达，其结果显示温阳补肾药含药血清对IL1β诱导凋亡的BMSCs均有抗凋亡作用，其组间比较结果为鹿角胶＞巴戟天＞淫羊藿＞骨碎补。 3.BMSCs成骨分化的形态学观察结果、碱性磷酸酶(ALP)比活性表达结果、细胞内骨钙素(BGP)的定量结果、荧光定量PCR检测核心结合因子a1(Cbfa1)和sclerostin的mRNA、Western Blot检测Cbfa1和sclerostin蛋白的表达，其结果显示温阳补肾药含药血清均能对BMSCs促成骨分化，其组间比较结果为巴戟天＞鹿角胶＞淫羊藿＞骨碎补。 结论： 1.巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补四味温阳补肾药均有促BMSCs增殖、抗凋亡及成骨分化的作用。淫羊藿促BMSCs增殖效果最佳，其组间比较结果为淫羊藿＞骨碎补＞巴戟天＞鹿角胶。 2.鹿角胶抗BMSCs凋亡效果最佳，巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补均能抗BMSCs凋亡，其机制主要是上调抑制凋亡基因Bcl-2的表达，下调促进凋亡基因Bax的表达，减少Caspase-3、Caspase-9mRNA的表达，抑制其蛋白酶活性从而降低细胞凋亡率。 3.巴戟天促进BMSCs成骨分化效果最佳，巴戟天、鹿角胶、淫羊藿、骨碎补均能促诱导BMSCs成骨分化，其机制主要通过增加细胞内ALP的比活性、BPG、Cbfa1的含量而发挥作用。