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目的探究新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell, AT-Ⅱ)的原代培养方法。通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制造细胞炎症模型，芪蛭皱肺颗粒给药干预，观察其对致炎AT-Ⅱ细胞形态学、生长周期、线粒体活性、肺泡表面活性蛋白A(SP-A)的影响。以探察其防治慢性阻塞性肺疾病（chronicobstructive pulmonary disease,COPD）的作用机制，同时为开发研究芪蛭皱肺颗粒提供药效学基础。方法取SPF级新生Wistar大鼠肺脏，采用胰蛋白酶联合胶原酶消化法分离AT-Ⅱ细胞，免疫黏附结合反复贴壁法纯化细胞，体外培养细胞，透射电镜鉴定细胞。细胞造模方法：10组生长状态及数目接近的细胞，2组不加LPS，2组加5ug/ml的LPS，2组加10ug/ml的LPS，2组加20ug/ml的LPS，2组加40ug/ml的LPS，干预1天。第二天，向用5种浓度LPS干预过的细胞其中一组加入100ug/ml的芪蛭皱肺颗粒，干预2天，同浓度的另一组作对照。观察并检测各组AT-Ⅱ细胞的形态学改变，板层小体、线粒体和生长周期的变化，以及SP-A的表达。结果（1）原代培养的AT-Ⅱ细胞生长状态良好。（2）电镜下观察到板层小体。LPS组板层小体数目减少，芪蛭皱肺颗粒干预组其数目有所增加。（3）MTT显示，LPS组AT-Ⅱ细胞出现异常增殖情况，且其增殖率随LPS浓度的升高而加强。芪蛭皱肺颗粒干预后，细胞增殖受到了抑制，增殖率有所下降。（4）细胞周期检测结果显示，LPS组AT-Ⅱ细胞的细胞周期处于G2期和S期的百分比较高。其增殖百分比随着LPS浓度的升高而上升。芪蛭皱肺颗粒干预后，G2期和S期的百分比有所下降。（5）激光共聚焦显微镜观察线粒体罗丹明123染色结果显示，空白组细胞的线粒体活性强，荧光亮度高。LPS组随着其浓度的升高，荧光强度逐渐减弱。加入芪蛭皱肺颗粒干预后，荧光强度有所恢复。（6）SABC免疫组化法检测SP-A显示：①DAB显色：空白组的AT-Ⅱ细胞质内可以观察到较多的棕黄色颗粒。空白加芪蛭皱肺颗粒组细胞内可见较空白组更多的棕黄色颗粒，颜色较深。而LPS组细胞内棕黄色颗粒明显减少，且LPS浓度越高，其棕黄色颗粒越少、颜色越浅。芪蛭皱肺颗粒干预组的细胞内，棕色颗粒较之同浓度LPS诱导组有所增加，且颜色有一定加深。②FITC荧光染色：空白组的AT-Ⅱ细胞荧光较强。空白加芪蛭皱肺颗粒组细胞荧光强度较空白组更大。而LPS组细胞荧光强度减弱，且随着LPS浓度的增高，荧光越来越淡，芪蛭皱肺颗粒干预组细胞的荧光强度较之同浓度LPS诱导组有所增加。结论本次实验提取的原代AT-Ⅱ细胞符合体外实验要求，第24~72h内处于最佳生长状态，是进行实验研究的理想时间段。LPS可以促使AT-Ⅱ细胞产生炎症反应而异常增殖，并减弱AT-Ⅱ细胞的SP-A表达，降低该细胞的生物学活性。芪蛭皱肺颗粒对LPS诱导致炎肺泡Ⅱ型上皮细胞的异常增殖有抑制作用，可改善细胞超微结构，促进SP-A表达，有助于提高AT-Ⅱ细胞的生物学活性。