以N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)为单体,羟乙基纤维素(HEC)为分散剂,N,N-亚甲基双丙烯酰胺(bisAM)为交联剂,过氧化苯甲酰/二甲基苯胺(BPO/DMA)为引发剂,牛血清蛋白(BSA)为模板,采用低温悬浮聚合方法,制备了平均粒径为200μm的牛血清蛋白大分子印迹交联聚乙烯基吡咯烷酮微球(BSA-IMs)。讨论了影响BSA-IMs粒径大小、分布和形态的各种因素:水油比、分散剂的种类及加入量、搅拌速度、引发剂的用量及加入方式、反应温度等。BSA-IMs的重结合行为测试结果表明,对牛血清蛋白有较好的特异选择性能,吸附平衡时的印迹效率(IE)可达到3.25。反应温度、BSA中加入盐的浓度、BSA溶液pH值、凝胶微球中模板的洗脱方式对BSA-IMs的吸附量和印迹效率都有不同程度的影响。反应温度会影响微球的形态进而间接影响吸附性能,随着反应温度的升高印迹效率稍有下降;BSA溶液中盐浓度达到某一值时,BSA-IMs的吸附量出现了极大值,而印迹效率呈现出逐渐下降的趋势;BSA溶液的pH值越低,BSA-IMs的吸附量也越大,但印迹效率逐渐降低;模板的洗脱方式对BSA-IMs的吸附量也有很大影响,用含1.0%SDS的10%乙酸(V/V)水溶液洗脱液对BSA-IMs进行洗脱,BSA-IMs体现出了较高的吸附量和印迹效率。