【摘 要】
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目的:观察清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤模型脑组织中MyD88和TRAF-6 mRNA表达的影响,探讨清热化瘀Ⅱ号方对脑缺血再灌注损伤的保护机制,为清热化瘀Ⅱ号方治疗脑缺血
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目的:观察清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤模型脑组织中MyD88和TRAF-6 mRNA表达的影响,探讨清热化瘀Ⅱ号方对脑缺血再灌注损伤的保护机制,为清热化瘀Ⅱ号方治疗脑缺血再灌注损伤提供实验依椐。 方法:将成年健康SD大鼠(雌雄各半),共192只,运用计算机软件随机分作两组,每组各96只。每组随机再分为4小组,包括空白组(A组):6只;假手术组(B组):30只;缺血再灌注模型组(C组):30只;清热化瘀Ⅱ号方组(D组):30只。B、C、D组按照缺血2h后,再灌注3h、6h、12h、24h、48h等5个时间点再分为5个亚组(n=6)。分别作如下处理:A组正常饲养,不作处理;B组线栓,但插入颈内动脉深度仅为9mm,术毕,正常饲养,灌胃同等量生理盐水;C组灌胃同等量生理盐水7d后行MCAO2h,再灌注后按各时间点处死实验动物。D组灌胃清热化瘀Ⅱ号方7d,术毕,继续灌胃,余操作同C组。各组实验大鼠取材后,一组行常规HE染色并镜下观察实验大鼠脑组织的病理形态学变化;另一组取材后应用荧光定量 PCR法检测实验大鼠的海马区MyD88和TRAF-6 mRNA表达变化。 结果:1 HE染色结果:(1)A、B组大鼠脑组织病理形态学无明显改变;(2)C、D组大鼠脑组织病理结构均明显受损。两者比较,D组在各时间点神经元受损显著减轻。2荧光定量 PCR检测结果:(1)A、B组中,MyD88和TRAF-6 mRNA均有少量表达;与B组相比,C组的MyD88和TRAF-6 mRNA表达含量在3h起开始增加并逐渐升高,约24h后达到顶峰,C组较B组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);(2)与C组相比,D组MyD88与TRAF-6的mRNA表达含量在3h时无明显差异,但在6h、12h、24h时显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论:清热化瘀Ⅱ号方可减轻脑缺血再灌注损伤,发挥脑保护作用。其作用机制可能为通过抑制大鼠脑缺血再灌注后 MyD88、TRAF-6的表达,进而阻断MyD88信号通路,发挥抗炎作用。
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