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研究目的：(1)观察血必净注射液对内毒素(Lipopolysaccharide, LPS)刺激下巨噬细胞增殖及吞噬功能的影响。(2)观察血必净注射液对脓毒症巨噬细胞分化的影响,并探索其发挥作用可能的信号通路。研究方法：(1)分离提纯小鼠腹腔巨噬细胞后,以1×106/ml密度种板。生长2h后,加入血必净注射液(Omg/ml,1mg/ml,5mg/ml,10mg/ml,50mg/ml,100mg/ml)孵育1h,再加入LPS (100ng/ml)刺激：分别于12h,24h,48h加入细胞增殖-毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)试剂,孵育2h后,酶标仪检测450nnm处的吸光值(OD450nm);孵育24h后,更换混有荧光微球的培养基(1：100),培养2h后,磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Solution, PBS)清洗未被吞噬的荧光微球,免疫荧光显微镜观察照相或用胰酶消化后上流式直接检测。(2)分离提纯小鼠腹腔巨噬细胞后,以1×106/ml密度种板,生长2h后,加入血必净注射液(Omg/ml,1mg/ml，5mg/ml,10mg/ml,50mg/ml,100mg/ml)孵育1h,再加入LPS (100ng/ml)刺激：分别在6h,12h,24h收集上清,酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)检测肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor, TNF)-α,白介素(Interleukin, IL)-6, IL-10;收集细胞进行流式检测F4/80+CD11c+CD206-及F4/80+CD11c-CD206+细胞比例；分别在0h,0.5h,2h,6h,24h固定细胞,使用活细胞ELISA方法检测Janus激酶(Janus Kinase)1-信号传导及转录激活因子(Signal Transducers and Activators of Transcription, STAT)6总量及其磷酸化的比例。(3)分离提纯小鼠腹腔巨噬细胞后,以1×106/ml密度种板,分别给予JAK1及STAT6抑制剂干预2h后,再加入血必净注射液(5mg/ml)培养1h,而后给予LPS (100ng/ml)刺激,24h后收集上清ELISA法检测TNF-α,IL-6, IL-10;收集细胞流式检测F4/80+CD100c+CD206-及F4/80+CD100c-CD206+细胞比例。(4)制备小鼠盲肠结扎穿孔(Cecal Ligation and Puncture, CLP)模型,实验组给予血必净注射液,对照组给予PBS,分别于术后0.5h,12h,24h,36h,48h,60h,72h,84h,96h进行肌肉注射：术后12h,24h,48h,60h,72h,84h,96h,120h计数存活小鼠,Kaplan-Merer法进行生存率分析；术后6h,24h,48h处死小鼠留取外周血血清检测]TNF-α, IL-6,IL-10;灌洗腹腔巨噬细胞流式检测F4/80+CD11c+CD206-及F4/80+CD11c-CD206+细胞比例。结果：(1)在一定剂量(5mg/ml)的血必净注射液干预下,LPS刺激下巨噬细胞增殖明显,而高于10mg/ml的剂量则会产生明显的抑制作用,在时间上则以48h时间点最为显著；在5mg/ml及10mg/ml剂量的血必净注射液干预下,LPS刺激后巨噬细胞的吞噬功能增强,而在50mg/ml和100mg/ml剂量下则产生抑制作用。(2)在中等剂量(5mg/ml)的血必净注射液干预下,LPS刺激后小鼠腹腔巨噬细胞由M1型向M2型分化,且以刺激24h最为明显；当剂量高于10mg/ml时,这种促进作用减弱。(3)中等剂量(5mg/ml)的血必净注射液在2h时间点下,JAK1-STAT6磷酸化增强；给予JAK1以及STAT6特异性抑制剂后,促M2型分化的效应减弱。(4)血必净注射液干预组小鼠外周血血清M1型相关细胞因子(TNF-α、 IL-6)较对照组明显降低,而M2相关的细胞因子(IL-10)较对照组升高；灌洗小鼠腹腔巨噬细胞中M2型巨噬细胞比例增加；小鼠生存率提高。结论：(1)中等剂量(5mg/ml)的血必净注射液可以促进LPS刺激下小鼠腹腔巨噬细胞的增殖,并增强其吞噬功能；而在高于10mg/ml的剂量下则会产生抑制作用。(2)中等剂量(5mg/ml)的血必净注射液可以促进LPS刺激下小鼠腹腔巨噬细胞由M1向M2分化,而在高于10mg/ml剂量下这种促进作用减弱；其作用的分子机制与JAK1-STAT6通路有关。(3)血必净注射液可以提高脓毒症小鼠的生存率,且与其促进小鼠巨噬细胞的分化有关。